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染色质免l疫共沉淀技术(ChIP)基于体内分析而发展的染色质免l疫沉淀分析Chromatinimmunoprecipitationassaykit,ChIP)技术可以真实、完整地反映结合在DNA序列上的调控蛋白。由于ChIP采用甲醛固定活l细胞或者***的方法,因此能比较真实的反映细胞内TF与Promoter的结合情况,还可以用来研究组蛋白的各种共价修饰与***表达的关系。近年来,这种技术得到不断的发展和完善。采用结合微阵列技术在染色体***表达调控区域检查染色体活性,pcr引物设计,是深入分析***l症、心血l管病以及******系统紊乱等***主要通路的一-种非常有效的工具。染色质免l疫沉淀分析(ChIP)的基本原理是在活l细胞状态下,当用甲醛处理时,相互靠近的蛋白与蛋白、蛋白与核酸(DNA或RNA)之间会产生共价键。细胞内,当F与Promoter相互结合时,它们必然靠的比较近或者契合在一起,这个时候用甲醛处理,能使它们之间产生共价键。固定的蛋白质DNA复合物通过超声或酶处理将其随机切断为-定长度范围内的染色质小片段然后通过抗原抗l体的特异性识别反应沉淀此复合体,特异性地富集目的蛋白结合的DNAl片段,通过对目的片断的纯化与检测,从而获得蛋白质与DNA相互作用的信息。通过qPCR或二代测序,筛选与目的蛋白互作的未知DNA信息。分子生物学服务公司建有100平米分子实验室,***检测多少钱,配备有PCR仪、定量PCR仪、电泳仪、恒温培养箱、恒温摇床、垂直电泳仪、蛋白转印仪、蛋白发光成像仪等设备。分子组技术人员毕业于中国农业大学、华中科技大学同济***院、浙江理工大学等高校生物***相关,内蒙古pcr,全部具有硕士研究生以上学历,熟练掌握分子生物学相关实验,可开展多种分子生物学检测服务。分子实验室部分设备聚合酶链式反应(PCR)操作步骤1.在冰浴中,按以下次序将各成分加入一无菌0.5ml离心管中。1QPCRbuffer5μldNTPmix(2mM)4μl引物1(10pM)μl2引物2(10pM)2μlTaq酶(2U/ul)1μlDNA模板(50ng-1μg/μl)1μl加ddH2O至μl50视PCR仪有无热盖,荧光定量pcr,不加或添加石蜡油。2.调整好反应程序。将上述混合液稍加离心,立即置PCR仪上执行扩增。-般:在93°C预变性3-5min,进入循环扩增阶段:93°C40s→58°C30s→72°C60s,循环30-35次,后在72°C保温7min。3.结束反应,PCR产物放置于4°C待电泳检测或-20°C长期保存。4.PCR的电泳检测:如在反应管中加有石蜡油,需用100ul进行抽提反应混合液,以除去石蜡油;否则,直接取5-10μl电泳检测。***检测多少钱-英瀚斯(在线咨询)-内蒙古pcr由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司是一家从事“***病理,细胞生物,分子生物学平台,动物模型科研外包服务”的公司。自成立以来,我们坚持以“诚信为本,稳健经营”的方针,勇于参与市场的良性竞争,使“英瀚斯”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上,用户至上”的原则,使英瀚斯在技术合作中赢得了客户的信任,树立了良好的企业形象。特别说明:本信息的图片和资料仅供参考,欢迎联系我们索取准确的资料,谢谢!)
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