5.长可以合成多长的引物？答：引物越长，出现问题的概率就越大。有的公司合成过120base的引物，产率很低。除非需要，pcr检测，建议合成片段长度不要超过80mer，按照目前的引物合成效率，80mer的粗产品，全长（还不一定正确）引物的百分比不会超过40%，后续处理还有丢失很多，的产量很低。6.需要合成多少OD数？答：根据实验目的确定。一般PCR扩增，2OD引物，福建pcr，可以做200-500次50ul标准PCR反应。如果是做***拼接或退火后做连接，实时荧光定量pcr，1OD就足够了。但是有些研究人员，就做几次PCR，但是却要5-10OD。做全***构建的引物都比较长，但是我们有些研究人员也要求高OD数。片段越长，全长得率就越低，出错的几率就越大。超出需要之外的OD数要求，其实也是对社会资源的一种浪费，同时也从一个侧面反映了部分研究人员特别是新手的自信心不足，总觉得需要重复多次才能成功。甲l基化特异性的PCRHerman等（1996）在使用重亚***盐处理的基础上新建的一种方法。该方法敏***高，主要用于作定性研究。用亚***氢盐处理***组DNA，所有未发生jia基化的胞嘧定被转化为尿嘧ding，而jia基化的胞嘧定不变；随后设计针对jia基化和非jia基化序列的引物进行PCR。通过电泳检测MSP扩增产物，如果用针对处理后jia基化DNA链的引物能得到扩增片段，则说明该位点存在jia基化；反之，说明被检测的位点不存在jia基化。特点：适用范围广，能够检测特异位点是否发生jia基化。亚***氢盐测序法（BisulfitesequencingPCR，BSP）亚***氢盐修饰后测序法（BSP）Frommer等（1992）提出的研究DNAjia基化方法，此方法可靠性及jing确度高，能明确目的片段中每一个CpG位点的jia基化状态。用亚***氢盐处理***组DNA，所有未发生jia基化的胞嘧ding被转化为尿嘧ding，而jia基化的胞嘧ding不变。随后设计BSP引物进行PCR，在扩增过程中尿嘧定全部转化为胸腺嘧定，***后对PCR产物进行测序就可以判断CpG位点是否发生jia基化，称为BSP-直接测序法。将PCR产物克long至载体后进行测序，可以提高测序成功率，这种方法称为BSP-ke隆测序法。特点：jing确度高，能够准确检测出jia基化的程度百分比。转录组测序转录组即某个物种或特定细胞在某一功能状态下产生的RNA的总和，pcr引物设计，是研究细胞表型和功能的一个重要手段。与***组不同的是，转录组的定义中包含了时间和空间的限定。同一细胞在不同的生长时期及生长环境下，其***表达情况是不相同的。转录组测序（RNA-Seq）是指利用第二代高通量测序技术进行cDNA测序，快速地获取某一物种特定qi官或***在某一状态下的转录本。相对于传统芯片而言，RNA-Seq无需预先设计探针，即可对物种的细胞类型的转录组进行检测，能够提供较的数字化信号，更高的检测通量以及更广泛的检测范围，是目前深入研究转录组复杂性的良好工具。pcr引物设计-英瀚斯(在线咨询)-福建pcr由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司位于江苏省南京市栖霞区和燕路371号东南大学***大学科技园科创楼A301。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前英瀚斯在技术合作中享有良好的声誉。英瀚斯取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。英瀚斯全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)