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细胞实验-南京英瀚斯生物科技-细胞实验外包哪家好
细胞实验介绍——流式细胞术检测细胞周期和凋亡流式细胞术检测细胞周期:细胞周期:指细胞从前一次分裂结束起到下一次分裂结束为止的活动过程,通常由G0/G1期、S期、G2期和M期组成。G0/G1期:有丝分裂发生,细胞分裂成两个细胞,进入下一个细胞周期,或者进入静止期(G0期),而G0期从DNA含量上无法与G1期区分,细胞开始RNA和蛋白质的合成,但DNA含量仍保持二倍体。S期:DNA开始合成,细胞核内DNA的含量介于G1期和G2期之间。G2期和M期:当DNA成为4倍体时,细胞进入G2期。G2期细胞继续合成RNA及蛋白质,直到进入M期。PI法是经典的周期检测方法。PI为插入性核酸荧光染料,能选择性的嵌入核酸DNA和RNA双链螺旋的碱基之间与之结合,其结合的量与DNA的含量成正比例关系,用流式细胞仪进行分析,就可以得到细胞周期各个阶段的DNA分布状态,从而计算出各个期的百分含量。一般流程:细胞收集-70%酒精固定过夜-PI染色-流式细胞仪检测。细胞凋亡:细胞凋亡的早期就有细胞膜表面破损发生。破损时凋亡细胞表面的磷脂腺丝氨酸(PS)可以从细胞内膜翻转至细胞的外膜。该过程发生在之前,检测PS的表达,能反映早期凋亡。AnnexinV是Ca2+依赖的磷脂结合蛋白,对PS有很高的亲和性,并且可以与暴露于细胞外的PS相结合。利用这一原理,可以将AnnexinV标记荧光来识别早期的细胞凋亡。通常利用AnnexinV-FITC和碘化丙啶(PI)来区分凋亡和坏死细胞。PI的膜通透性很差,因而只能标记坏死的细胞。一般流程:细胞收集-PI-AnnexinV标记-流式细胞仪检测。结果示例:图A细胞周期检测图;B细胞凋亡检测图小鼠精原gan细胞分离富集和培养成年小鼠gao丸中约有108个细胞,细胞实验外包,其中约有2×104个是精原gan细胞,仅占gao丸生精上皮细胞总数的0.02~0.03%,精原gan细胞数量太少不利于体外培养.分离和富集精原gan细胞成为精原gan细胞体外培养能否成功的前提条件.寻找分离和富集小鼠精原gan细胞有效方法.方法:出生6-8天小鼠为实验对象,先用0.25%胰酶1mMEDTA消化gao丸10min,细胞实验外包哪家好,用胎牛xue清终止消化,用一次40-um孔径的滤器过虑制成单细胞悬液,30%percoll不连续密度梯度法离心富集精原gan细胞,再根椐未分化精原gan细胞表面thy1.2(CD90.2)阳性CD117(c-kit)阴性特点用流式细胞仪将精原gan细胞分选出来,并在体外进行培养尝试.结果:30%percoll密度梯度离心前CD117(c-kit)阳性细胞占13.80±3.34%,CD90.2阳性细胞占28.98±4.51%,细胞实验外包选哪家,二者都阳性细胞占8.98±2.98%,CD117阴性CD90.2阳性细胞占18.36±2.67%;离心后CD117(c-kit)阳性细胞占12.37±3.34%,细胞实验,CD90.2阳性细胞占56.98±4.51%,二者都阳性细胞占8.20±3.98%,CD117阴性CD90.2阳性细胞占32.36±3.67%;CD117(c-kit)阳性细胞和二者都阳性细胞所占百分比前后比较差异无显著性(P>0.1),CD90.2阳性细胞和CD117阴性和CD90.2阳性细胞所占百分比前后比较差异有显著性(P<0.05);采用CD117和CD90.2作为标志分子,percoll离心后细胞悬液经FACS分选后获得细胞纯度透射电镜观察:可见凋亡细胞表面微绒毛消失,核染色质固缩、边.集,常呈新月形,核膜皱褶,胞质紧实,细胞器集中,胞膜起泡或出“芽”及凋亡小体和调亡小体被临近巨噬细胞吞噬现象。结果评判:调亡细胞体积变小,细胞质浓缩。调亡I期(pro-apoptosisnuclei)的细胞核内染色质高度盘绕,出现许多称为气穴现象(c***itati)的空泡结构;IIa期细胞核的染色质高度凝聚、边缘化;细胞凋亡的晚期,细胞核裂解为碎块,产生调亡小体。细胞实验-南京英瀚斯生物科技-细胞实验外包哪家好由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。细胞实验-南京英瀚斯生物科技-细胞实验外包哪家好是南京英瀚斯生物科技有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:戴经理。)