实验动物-动物实验-英瀚斯生物科技公司
动物睡眠剥夺模型,睡眠剥夺是研究睡眠的功能与发生机制的重要方法。睡眠剥夺模型的选择将直接影响睡眠剥夺实验的可靠性及准确性对睡眠剥夺实验结果具有重要的影响。现将几种常用的睡眠剥夺模型的方法评价及进展情况综述如下。1.平台睡眠剥夺技术此类方法主要是利用大鼠畏水及在水中无法进入睡眠的生活习性,通过在盛水的水槽中放置平台,让大鼠站立在平台上,因平台直径足够小(直径6.5cm或更小)当大鼠进入REM时,因全身肌张力降低引起节律性低头触水以此来达到剥夺REM的目的,动物实验,此类方法简单易行无需复杂昂贵的设备,在不同条件的实验室均能开展因而应用广泛其主要用来剥夺大鼠的REM,可分为以下三种方法:1.1单平台睡眠剥夺法此方法早于1964年被应用在猫的睡眠剥夺实验中,不久以后有人将此方法应用于大鼠的睡眠剥夺实验,方法为将一圆柱形台(直径约65mm)放置在长400mm宽340mm高160mm的水槽中,往水槽中加水至平台露出水面约10mm,将1只大鼠置于台上,大鼠可在平台上站立,可进入NREM,当大鼠进入REM时全身骨骼肌张力明显降低,颈部肌张力降低引起节律性低头触水从而无法进入REM,采用SP实验可引起动物的体重及胸腺重量减轻,上腺重量增加,血浆中上腺皮质酮增加,动物攻击行为增加,机体反应***等。因SP是单只大鼠进行实验且在实验中大鼠的活动空间受限,动物实验室,故有学者认为以上的临床与实验室表现可能与大鼠的群体隔离或活动空间受限有关,进一步研究发现,在实验前群体饲养的动物当与群体隔离后也会出现攻击行为增加,血浆中CORT增加,功能***等表现。大鼠活动空间受限也可引起血浆中CORT的水平的增加,这些结果与单平台睡眠剥夺实验中见到的类似,为克服SP中大鼠与群体分离及活动空间受限的缺点,在SP基础上进一步发展为多平台睡眠剥夺法。1.2多平台睡眠剥夺法MP法于1981年先应用在大鼠睡眠剥夺实验中,在MP中为扩展大鼠的活动空间将台由SP中的1个增加至7个,仍将1只大鼠放在台间进行睡眠剥夺试验,因大鼠可以在7个台间自由活动,故活动范围较SP中有明显增大。经实验比较,在MP中反映应激增强的一些指标,如上腺重量增加和胸腺重量减少仍然存在,甚至在大鼠血液中ACTH%CORT的增加及上腺重量的增加较SP的更高,提示MP较SP有更强的应激性!考虑到大鼠为群居动物,单只大鼠实验易导致与所在群体的隔离。为克服群体隔离所带来的应激反应,有学者将MP法进一步改良发展为改良多平台睡眠剥夺法!三、实验指标区域指标开臂1停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂2停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)开臂3停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)其他臂停留时间、活动路程、进入次数、潜伏期、平均速度(X轴投影速度)四、实验方法及应用1)动物适应实验环境1周后,实验动物,称重,禁食24小时。此后每天训练结束后限制性地给予正常食料(据体重不同,大鼠16-20g,小鼠2-3g),以使体重保持在正常进食大鼠的80%~85%。2)第二天,迷宫各臂及***区分撒着食物颗粒(每只4~5粒,直径约3~4mm)。然后,同时将4只动物置于迷宫***(通往各臂的门打开)。让其自由摄食、探究10min。3)第三天,重复第二天的训练。这一过程让动物在没有很强的应激条件下熟悉迷宫环境。4)第四天起,动物单个进行训练:在每个臂靠近外端食盒处各放一颗食粒,让动物自由摄食。食粒吃完或10min后将动物取出。5)第五天,将食物放在食盒内,重复前一天的训练,一天2次。6)第六天以后,随机选4个臂,每个臂放一颗食粒;各臂门关闭,将动物放在迷宫***;30s后,臂门打开,让动物在迷宫中自由活动并摄取食粒,实验动物模型公司,直到动物吃完所有4个臂的食粒。如经10min食粒仍未吃完,则实验终止。每天训练两次,其间间隔1h以上。实验动物-动物实验-英瀚斯生物科技公司由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。行路致远,砥砺前行。南京英瀚斯生物科技有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴,更矢志成为技术合作具有竞争力的企业,与您一起飞跃,共同成功!)
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