企业视频展播，请点击播放视频作者：北京创新通恒科技有限公司如何用制备色谱柱制备低含量的杂质？制备色谱柱为ZorbaxSB-C189.4*250mm及gilson馏分收集器，色谱仪为Agilent1100或LC-6A。想用其制备面积***化法含量为0.05%左右的杂质，高压制备色谱系统哪家质量好，初步提纯后用高分辨的LC-MS进行定性分析。如何设定色谱条件，高压制备色谱系统，如，流量、进样量、样品的浓度、切割点的设置、是否要浓缩，要求将95%以上的主峰切除。（主峰后有二个杂质靠得很近。）答：1.制备用的流动相尽量等级高一点，否则流动相中的杂质会影响LC-MS分析。2.使用馏分收集器时，延迟体积一定要计算准确，检测器的响应时间设到很小，否则都会影响收集的纯度和回收率。制备柱的流速一般与直径的平方成正比，如果4.6mm分析柱流速为1mL/min，9.4mm制备柱用1*（9.4/4.6）2，大约为4mL/min。进样量设到几个mg应该基本没有过载。进样样品浓度越高越好。假如进样10mg，理论计算0.05%的杂质大约只有5μg，显然浓度太低，尽量是多做几次，合并馏分然后浓缩后做LC-MS分析。流动相HPLC中使用的流动相是液体，而在气相色谱法中则是气体。由于液体的密度和粘度较高，因此要使用泵来给流动相推动压力通过HPLC色谱柱，因此液相色谱的背压通常很高，比如超高压液相色谱。背压太高会对液相系统造成负担，因此适当的控制在合适的压力程度，有助于我们分析测试的正常运行。恒谱生的液相色谱柱、保护柱、在线过滤器等都能做到低背压，死体积小，避免对分析结果造成影响。多肽的分离制备，如何上量？如何增大分离度?反相HPLC应当是很好的分离小肽方法，用CH3CN或CH3OH：H2O（95：5）做流动相，看保留如何，若无保留，建议改用其他色谱方法进行分离。关于多肽的分离，首先要知道它的分子量大小，高压制备色谱系统多少钱，然后选择不同类型的填料，如孔径的大小。我们先在分析柱（4.6mm内径）上做一下实验，找到很大的分离度，这一过程的难度是很大的，要不断地改变流动相和固定相，然后再线性或非线性放大到制备，放大的倍数按分析柱的实验结果。分离后可以通过冷冻干燥得到固体。还可以考虑离子交换来分l离。高压制备色谱系统-创新通恒科技由北京创新通恒科技有限公司提供。高压制备色谱系统-创新通恒科技是北京创新通恒科技有限公司今年新升级推出的，以上图片仅供参考，请您拨打本页面或图片上的联系电话，索取联系人：李经理。)