人环磷酸腺苷 cAMP ELISA-纽斯特生物技术
武汉纽斯特生物科技有限公司(d),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等。固相载体的选择:许多物质可作为固相载体,如聚氯乙l烯、聚苯乙l烯、聚丙酰胺和纤维素等。其形式可以是凹孔平板、试管、珠粒等。常用的是40孔聚苯乙l烯凹孔板。不管何种载体,在使用前均可进行筛选:用等量抗原包被,在同一实验条件下进行反应,观察其显色反应是否均一性,据此判明其吸附性能是否良好。武汉纽斯特生物科技有限公司(d),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和***等客户建立了长期稳定的合作关系,人环磷酸腺苷cAMPELISA,产品销往世界。***准备非乙酰化cGMP标准品将5000pmol/mLcGMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#7标记六只洁净试管。移取475μL0.1MHCl到#1号试管,400μL到#2至#7号试管。加入25μL5000pmol/mLcGMP标准品到#1管中,剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中,涡旋震荡。以此类推,重复上步操作,梯度稀释至#7管。经以上操作,#1至#6管中cGMP标准品浓度分别为250,50,10,2,0.4,0.08和0.016pmol/mL(详见cGMP加样表)。稀释过的标准品需在30分钟内使用。标记一只试管作为无标准品空白对照(NSB)。移取600μL0.1MHCl到NSB管中。洗涤液将15mL10×洗涤液储液加到135mL去离子水中,稀释成工作液。稀释液可在室温保存至***盒有效期限,或者3个月。实验步骤使用前将各种***取出放置30分钟,平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。快速加入***至样品中,立即漩涡震荡2秒混匀。1.依据实验键盘纸决定酶标条的使用量,将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋,密封,4℃保存。2.移取50μL中和液至各个微孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。3.移取100μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔(0pmol/mLcAMP标准品)。4.移取100μLcAMP标准品至相应的孔。5.移取100μL样品至相应的孔。6.移取50μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔。7.移取50μL偶联酶至各孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。8.移取50μL抗l体工作液至各孔中,除了TA(全活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非特异结合)孔。9.将酶标孔置于孔板振动器上,250~500rpm,室温孵育2小时。10.在吸水纸上拍干微孔内溶液,加洗涤液400μL每孔洗3次,每次需拍干。11.后一次洗涤,清空各微孔,在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次,以确保没有洗涤液残留。12.加5μL偶联酶至TA(全活性)孔。13.每孔200μL显色底物溶液,于室温静置5~30分钟。(显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合,并避光放置。)14.每孔加入50μL终止液。终止后立即读数。15.清除酶标l仪Blank(空白)孔值,读取450nm处的光密度值,在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除Blank(空白)孔值,那么手动扣除每个读数的Blank(空白)孔光密度值。人环磷酸腺苷cAMPELISA-纽斯特生物技术由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是湖北武汉,生***工的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在武汉纽斯特***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创武汉纽斯特更加美好的未来。)
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