cGMP assaykit-纽斯特(在线咨询)
***盒储存要求本***盒所有组分在有效期限内,于4℃稳定保存。为了长效的实验,1000×储液请保存于-80℃。本***盒未提供的必需***1.去离子水或蒸馏水。2.浓盐酸。3.量程在5μL至1000μL之间的精密移液管。4.量程为50μL和200μL的中继移液器。5.用于稀释储液的一次性烧杯。6.刻度量筒。7.微孔板振荡器。8.吸水纸。9.酶标l仪,可读波长450nm,在570nm至590nm之间应有修正。通过鸟苷酸环化酶可以实现GTP转化为cGMP。在哺乳动物中,存在2种类型的鸟苷酸环化酶:可溶性及膜结合的鸟苷酸环化酶(8,10,cGMPassaykit,11)。可溶性环化酶在一氧化氮与血红素辅基结合后,即被激l活。七层膜结合鸟苷酸环化酶(即跨膜鸟苷酸环化酶或鸟苷酸环化酶微粒)已被证实存在于人类***组中,鸟苷酸环化酶A和B是利l尿钠肽受体,鸟苷酸环化酶C能被热稳定***肠毒l素、鸟苷素和脲激l活。跨膜鸟苷酸环化酶的活性亦受胞内信号通路的其他受体信号所调控。实验步骤使用前将各种***取出放置30分钟,平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。快速加入***至样品中,立即漩涡震荡2秒混匀。1.依据实验键盘纸决定酶标条的使用量,将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋,密封,4℃保存。2.移取50μL中和液至各个微孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。3.移取100μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔(0pmol/mLcAMP标准品)。4.移取100μLcAMP标准品至相应的孔。5.移取100μL样品至相应的孔。6.移取50μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔。7.移取50μL偶联酶至各孔中,除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。8.移取50μL抗l体工作液至各孔中,除了TA(全活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非特异结合)孔。9.将酶标孔置于孔板振动器上,250~500rpm,室温孵育2小时。10.在吸水纸上拍干微孔内溶液,加洗涤液400μL每孔洗3次,每次需拍干。11.后一次洗涤,清空各微孔,在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次,以确保没有洗涤液残留。12.加5μL偶联酶至TA(全活性)孔。13.每孔200μL显色底物溶液,于室温静置5~30分钟。(显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合,并避光放置。)14.每孔加入50μL终止液。终止后立即读数。15.清除酶标l仪Blank(空白)孔值,读取450nm处的光密度值,在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除Blank(空白)孔值,那么手动扣除每个读数的Blank(空白)孔光密度值。cGMPassaykit-纽斯特(在线咨询)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是湖北武汉,生***工的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在武汉纽斯特***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创武汉纽斯特更加美好的未来。)
武汉纽斯特生物技术有限公司
姓名: 黄经理 先生
手机: 15002729010
业务 QQ: 2892088303
公司地址: 湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼
电话: 027-87561033
传真: 027-87561033