本***盒利用竞争酶联免l疫分析方法来测定细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP的水平。简而言之，将羊抗鼠多克l隆抗l体包被在酶标板上，细胞提取物或体外腺苷酸环化酶实验中的cAMP与固定数量的偶联辣根过氧化物酶的cAMP或碱性磷酸酶竞争性的结合抗cAMP单克l隆抗l体，已知的cAMP作为标准品来做标准曲线。经过一段时间孵育，洗掉所有***，加入底物进行显色。将多孔板置于酶标l仪上，于450nm或405nm波长下，进行读数。***的光强度与样品中cAMP的浓度呈反比关系。基于cAMP标准品所得曲线，通过测得的光密度可以计算出样品中cAMP的浓度。实验步骤使用前将各种***取出放置30分钟，平衡至室温。所有标准品和样品必需设置平行对照实验。快速加入***至样品中，立即漩涡震荡2秒混匀。1.依据实验键盘纸决定酶标条的使用量，将剩余的酶标条连同干燥剂一起放回密封塑料袋，密封，4℃保存。2.移取50μL中和液至各个微孔中，除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。3.移取100μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔和B0孔(0pmol/mLcAMP标准品)。4.移取100μLcAMP标准品至相应的孔。5.移取100μL样品至相应的孔。6.移取50μL0.1MHCl至NSB(非特异结合)孔。7.移取50μL偶联酶至各孔中，除了TA(全活性)孔和Blank(空白)孔。8.移取50μL抗l体工作液至各孔中，除了TA(全活性)孔、Blank(空白)孔和NSB(非特异结合)孔。9.将酶标孔置于孔板振动器上，250~500rpm，室温孵育2小时。10.在吸水纸上拍干微孔内溶液，加洗涤液400μL每孔洗3次，每次需拍干。11.后一次洗涤，清空各微孔，在干净的无尘吸水纸上轻巧酶标板数次，以确保没有洗涤液残留。12.加5μL偶联酶至TA(全活性)孔。13.每孔200μL显色底物溶液，于室温静置5~30分钟。（显色底物A和B需在临用前15分钟内等体积混合，并避光放置。）14.每孔加入50μL终止液。终止后立即读数。15.清除酶标l仪Blank(空白)孔值，读取450nm处的光密度值，人环磷酸腺苷cGMPELISA，在570nm至590nm之间有修正。如果酶标l仪不能自动清除Blank(空白)孔值，那么手动扣除每个读数的Blank(空白)孔光密度值。进口分装：检测范围和灵敏度不同，用量少时，可使用分装，前期是它的长久性不是很好。***盒的标准曲线较高点OD值均在2.0±0.2，零孔的OD值都控制在0.10以下。***盒的标准曲线相关系数R≥0.98。***盒重复性好，板内、板间变异系数均<9%。***的组份都多给20%的富余量，确保完成48/96孔的检测，避免分次检测可能造成***量不足的情况。检测抗l体及酶结合物的稀释度合适(均为1:30)，方便试验操作者准确地做稀释工作，保证实验结果的重复性。纽斯特(多图)-人环磷酸腺苷cGMPELISA由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。“G蛋白活性,cAMP和cGMPELISA***盒,蛋白点突变”选择武汉纽斯特生物技术有限公司，公司位于：湖北省武汉市东湖新技术开发区高新大道666号光谷生物城B3-3栋3楼，多年来，武汉纽斯特坚持为客户提供好的服务，联系人：黄经理。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。武汉纽斯特期待成为您的长期合作伙伴！)