目前商业化提供的一些cAMP检测***盒主要应用ELISA的方案，使用的是非亲和纯化的cAMP多克l隆抗l体，尽管具有灵敏性，这些多克l隆抗l体与ATP存在一定程度的交叉反应。基于ATP是cAMP生产的底物，很有必要找到一种能高特异性识别cAMP的抗l体。纽斯特生物开发出了鼠单克l隆抗l体的cAMPELISA检测***盒。该单克l隆抗l体对cAMP的特异性比cAMP、ATP等类似的小分子高出108倍以上。相较于其他的多克l隆抗l体cAMP***盒，纽斯特生物cAMPELISA***盒能显著的提高其灵敏性和特异性，且能有效避免来自动物多克l隆抗l体的批次间差异，因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。对于生长的***培养液中的细胞，首先移除培养基，然后加入0.1MHCl处理细胞。孵育10分钟并观察细胞是否被裂解；如果裂解不充分，接着孵育10分钟并观察。以大于600g离心力于室温离心，收集上清直接用于实验。临用前在0.1MHCl中加入0.1%至1%浓度的Triton-x100可增强细胞和***裂解。在这个浓度范围内，去污剂并不干扰试验的结合部位，但是会适度的增加光密度值。含有Triton的样品需利用标准曲线估计浓度，为了较精l确的测定，标准曲线需以相同方式稀释。取1mL细胞培养上清加入10μL浓盐酸，600g离心力于室温离心，人环磷酸腺苷cAMPELISA，上清液直接用于实验测定分析。ELISA检测***盒应用定性夹心免l疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗l体，这些抗l体就会与HEV的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与头一次孵育结合上的HEVIgM抗l体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEVIgM抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入***溶液终止酶和底物间的反应，并在波长:450nm处测量O.D.值，按照本HEVIgM抗l体elisa***盒的测试标准，O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。武汉纽斯特生物(多图)-人环磷酸腺苷cAMPELISA由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是从事“G蛋白活性,cAMP和cGMPELISA***盒,蛋白点突变”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：黄经理。)