neweast-Mouse cAMP kit
武汉纽斯特生物科技有限公司(d),系美国生命科学***供应商美国NewEastBio在中国的子公司。公司位于武汉东湖高新技术开发区光谷生物城.美国NewEastBio专注于生命科学和生物技术领域,主要产品有小分子、ELISA***盒、蛋白等,与世界高校和研究所、世界大制药公司、生物科技公司和***等客户建立了长期稳定的合作关系,产品销往。体外用GTPγS/GDP处理蛋白以用作阳性和阴性的对照注意:在细胞体内环境条件下大约有10%的Ras被激l活,MousecAMPkit,而在体外用GTPγS处理大约有90%的Ras被激l活。1.准备两个离心管,每个管中各加入0.5mL的细胞提取物(如果是纯的Ras蛋白则每个管中加入的蛋白量为1ug)。2.每个管中加入20ul0.5MEDTA(终浓度即为20mM)。3.一个管中加入5ul的100XGTPγS(终浓度即为100uM)作为阳性对照。另一个管中加入5ul的100XGDP(终浓度即为1mM)作为阴性对照。4.将离心管置于30°C条件下反应30min并不断搅动。5.终止反应:将管置于冰上并加入32.5ul1MMgCl2(终浓度即为60mM)。目前商业化提供的一些cAMP检测***盒主要应用ELISA的方案,使用的是非亲和纯化的cAMP多克l隆抗l体,尽管具有灵敏性,这些多克l隆抗l体与ATP存在一定程度的交叉反应。基于ATP是cAMP生产的底物,很有必要找到一种能高特异性识别cAMP的抗l体。纽斯特生物开发出了鼠单克l隆抗l体的cAMPELISA检测***盒。该单克l隆抗l体对cAMP的特异性比cAMP、ATP等类似的小分子高出108倍以上。相较于其他的多克l隆抗l体cAMP***盒,纽斯特生物cAMPELISA***盒能显著的提高其灵敏性和特异性,且能有效避免来自动物多克l隆抗l体的批次间差异,因此可以提供长久有效地可重复性定量检测。***盒组成材料和***1.羊抗小鼠IgG包被的96孔微孔板一张catalogNo.30101该微孔板将特异性识别小鼠IgG的山羊抗l体包被于可拆分酶标条上。2.cAMP偶联的辣根过氧化物酶工作液6mLcatalogNo.30102本包装含1000×偶联酶储存液和稀释缓冲液。3.抗cAMP的小鼠单克l隆抗l体工作液6mLcatalogNo.26002-2本包装含1000×抗l体储存液和稀释缓冲液。注意:为了稳定和长效的实验,抗l体储存于-80℃。在使用前将6μL1000×偶联酶储存液加入到6mL稀释缓冲液中配制为工作液,并轻轻混匀。工作液请避免反复冻融。4.中和液6mLcatalogNo.301035.10×浓缩洗涤液15mLcatalogNo.30103含去污剂的磷酸盐缓冲液。6.cAMP标准品0.25mLcatalogNo.30203浓度5000pmol/mL7.显色底物A,12mLcatalogNo.301078.显色底物B,12mL。catalogNo.301089.终止液,6mL;catalogNo.30110注意:该溶液有腐蚀性;储存时请旋紧瓶盖neweast-MousecAMPkit由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的生***工等行业积累了大批忠诚的客户。武汉纽斯特带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)