ELISA检测***盒应用定性夹心免l疫检测技术，用合成的HEV多肽抗原包被微孔板板条，这些多肽是中国型HEV毒株氨基酸序列中抗原性很强的肽段，分别来自于该毒株的开放阅读框2和开放阅读框3。将样品或标准品加入孔中并孵育，如果其中存在HEVIgM抗l体，这些抗l体就会与HEV的多肽抗原结合，并固定在上面，洗板除去其它非特异性抗l体和样品中的其它成份。然后加入羊抗人IgM-HRP（辣根过氧化物酶）酶结合物，经第二次孵育后，酶结合物就会与头一次孵育结合上的HEVIgM抗l体相结合，洗板除去未结合的酶结合物，加入TMB底物溶液，cAMPkit，在第三次孵育时会发生酶-底物反应，只有那些含有HEVIgM抗l体和酶结合物所形成的复合物的孔才会发生颜色变化，加入***溶液终止酶和底物间的反应，并在波长:450nm处测量O.D.值，按照本HEVIgM抗l体elisa***盒的测试标准，O.D.值大于或等于Cut-Off值的样品被认为是初试阳性。因此为筛选出腺苷酸环化酶的激l活剂或磷酸二酯酶的***l剂，需要一个高敏感度、特异性的、可重复的方案用于检测cGMP的含量。考虑到大分子的化合物可能存在较弱的影响，这一个初筛是有必要的。目前商业化提供的一些cGMP检测***盒主要使用的是非亲和纯化的cGMP多克l隆抗l体。尽管据称有特异性，但这些多克l隆抗cGMP抗l体与cAMP和GTP呈现一定程度的交叉反应。且在大多数细胞类型中，cGMP含量低于cAMP100倍。包括以下步骤：1)抗原表位的计算机筛选；2)抗原的制备；3)血l清的采集；4)间接ELISA方法的建立；5)间接ELISA方法的敏***和特异性验证；6)***盒的稳定性验证；7)对屠宰场进行临床检测。该方法简单、快速、灵敏度高、特异性强、稳定性合格、重复性好。应用本发明制得的***盒能有效检出感l染猪的戊型肝l炎病毒，适用于大批量发病样本的检测，可用于猪戊肝的快速诊断，并预防、控制猪戊肝l病毒的流行和阻断戊肝l病毒由猪向人传播。cAMPkit-纽斯特生物技术(图)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司是从事“G蛋白活性,cAMP和cGMPELISA***盒,蛋白点突变”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：黄经理。)