ELISA的基础是抗原或抗l体的固相化及抗原或抗l体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗l体仍保持其免l疫学活性，酶标记的抗原或抗l体既保留其免l疫学活性，又保留酶的活性。在测定时，受检标本（测定其中的抗l体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗l体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗l体复合物与液体中的其他物质分开。再加入酶标记的抗原或抗l体，cAMPassaykit，也通过反应而结合在固相载体上。此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免l疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。ELISA可用于测定抗原，也可用于测定抗l体。然而，影响Elisa试验结果的因素很多，故加强各个环节的才能充分发挥其方法学的优点。***准备1.非乙酰化cAMP标准品将5000pmol/mLcAMP标准品溶液平衡至室温。从#1至#6标记六只洁净试管。移取475μL0.1MHCl到#1号试管，400μL到#2至#6号试管。加入25μL5000pmol/mLcAMP标准品到#1管中，剧烈涡旋震荡。从#1管中取出100μL溶液至#2管中，涡旋震荡。以此类推，重复上步操作，梯度稀释至#6管。经以上操作，#1至#6管中cAMP标准品浓度分别为250，50，10，2，0.4和0.08pmol/mL（详见cAMP实验稀释详情键盘纸）。稀释过的标准品需在30分钟内使用。标记一只试管作为无标准品空白对照（NSB）。移取600μL0.1MHCl到NSB管中。2.洗涤液将15mL10×洗涤液储液加到135mL去离子水中，稀释成工作液。稀释液可在室温保存至***盒有效期限，或者3个月。纽斯特生物的ELISA***盒适用于检测经过盐酸处理而终止内源性磷酸二酯酶活性的cAMP样品。这种样品可直接应用于检测，而不需要蒸发和进一步的处理。***样本需预先冰冻于液氮中。在不锈钢研钵中用液氮将组子样本研磨成精细粉末。待液氮挥发完后，称量冰冻***样本并加入10倍体积的0.1MHCl混匀。室温以大于600g离心力离心，取上层清夜用0.1MHCl稀释至适当浓度。cAMPassaykit-武汉纽斯特(推荐商家)由武汉纽斯特生物技术有限公司提供。武汉纽斯特生物技术有限公司实力不俗，信誉可靠，在湖北武汉的生***工等行业积累了大批忠诚的客户。武汉纽斯特带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)