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使用方法1.用生理盐水将抗原稀释到2倍***终浓度(按每针次50μl用量配制)。备注:推荐使用的抗原用量为(1)免0疫原性较弱的合成肽每针次10-100μg;(2)亚单位蛋白抗原每针次1-10μg;(3)免0疫原性较强的灭活病原微生物和病毒样颗粒抗原每针次1-10μg;(4)肿0瘤细胞裂解物每针次10-100μg。2.37oC水浴中解冻佐剂,充分混匀,无菌条件下取出所需用量(按每针次50μl)与抗原按体积比1:1混匀。3.通过后腿小腿肌肉或腹0股0沟皮下0***免0疫小鼠,每只小鼠***100μl。4.第7天按同样方式加强免0疫1针。备注:每次免0疫佐剂和抗原现配现用5.第014天通过ELISPOT、胞内细胞0因子染色、MHC四聚体染色或其他可行方法检测脾0脏或引流淋巴0结中的抗原特异性CD4+TH1和/或CD8+CTL反应。原理新型乳剂是一种具有自主知识产权、独0特配方的新型油包水佐剂,3C蛋白酶,用于免0疫小鼠和家兔等实验动物以制备单、多克0隆抗0体。该佐剂以弗氏不完全佐剂为基础,添加了多种具有强免0疫刺激0活性的TLR配体。新型佐剂与常规使用的弗氏佐剂相比,具有以下优点:(1)新型乳剂活性强于弗氏不完全佐剂;(2)与弗氏完全佐剂不同,不含有干扰免0疫应答的无关蛋白成分;(3)安全性好,副反应率低;(4)免0疫针次少、抗原用量低等多方面优点。由于改良免0疫法只需二次基础免0疫而常规免0疫法则需要2倍于改良法的免0疫次数,所以改良法抗原用量明显少于常规法,从而大大减少了实验成本的消耗。此外,本实验通过对比两种免0疫方法的细胞融合率及抗0体阳性率,发现改良免0疫法均显著高于常规免0疫法。经过后续实验,证明改良法免0疫小鼠的杂交瘤细胞经二次克0隆化后,抗0体阳性率可达检测孔的90%以上。杂交瘤细胞体外连续传代培养,并冻存复苏后仍具有分泌AFP—McAb的能力,并经染色体计数结果表明已成功获得一株AFP—McAb细胞株。这表明改良法与常规方法具有同样的有效性和稳定性。3C蛋白酶-博特龙技术有限公司由苏州博特龙技术有限公司提供。苏州博特龙技术有限公司拥有很好的服务与产品,不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员,点击页面的商盟***图标,可以直接与我们***人员对话,愿我们今后的合作愉快!)
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