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恒温快速扩增***盒常用酶原料尿DNA糖基化酶尿DNA糖基化酶(UDG酶)又称尿-N-糖基化酶(UNG酶),可水解含尿的单链和双链DNA释放出游离尿,而对RNA无活性,与dUTP搭配使用,可建立成PCR防污染体系。其原理如下:在PCR体系中将dTTP部分或全部替换为dUTP后,使得反应生成含有dU碱基的扩增产物,这些扩增产物不同于天然模板,在进入含有UDG酶的反应体系时,可被UDG酶识别并切割尿碱基与糖磷酸骨架间的N-糖基键,WLRB8204KIT***盒,而经切割后的DNA链在碱性或高温条件下易于断裂降解,从而失去被当作模板再扩增的能力,因此可防止扩增子污染(如下图)。市面上的UDG酶主要有普通型和热敏型,其中热敏型UDG酶在室温条件下即可催化反应,50℃以上加热可使其灭活,防止其降解后续PCR形成的含dU扩增产物。虽然UDG/dUTP体系具有防污染功能,但在实际测试中还得兼顾PCR的效率和灵敏度。一方面需确保PCR扩增产物掺入足够量的尿碱基,从而可被UDG有效切割;另一方面也需要保证反应体系添加的dUTP不会明显影响PCR效率,因此dTTP和dUTP的佳比例需通过优化确定。恒温快速扩增***盒应在怎样的温度下使用?标准的ERA扩增***盒经过配制可在37℃-42℃的温度范围内操作。过高的温度会对反应体系产生不利的影响,因为酶会逐渐地失去全部活性。对于RT***盒,我们建议客户在40℃下运行反应,基础型WLRB8204KIT***盒代理商,因为逆转录酶在稍高温度下具有更高的活性。立博泰业——多年销售恒温快速扩增***盒,我们公司坚持用户为上帝,荧光型WLRB8204KIT***盒报价,想用户之所想,急用户之所急,以诚为本,讲求信誉,以产品求发展,以质量求生存,我们热诚地欢迎各位同仁合作共创辉煌。恒温扩增常用酶恒温扩增的方法多种多样,其对应的酶体系也各有差别,且一般为多酶体系,在酶原料选择上相比PCR复杂,下面只列举一些主要的恒温扩增方法相关酶。LAMP相关酶环介导等温扩增技术(Loop-mediatedisothermalamplification,基础型WLRB8204KIT***盒批发,LAMP)所用酶主要为具有链置换功能的DNA聚合酶,详细原理可参考聊聊恒温扩增技术。常用酶为BstDNA聚合酶,用于DNA链合成,同时具有链置换功能;若检测模板为RNA,则可加入逆转录酶配制成RT-LAMP反应体系。基础型WLRB8204KIT***盒批发-立博泰业公司由北京立博泰业科技有限公司提供。北京立博泰业科技有限公司是从事“恒温快速扩增***盒,恒温荧光扩增仪”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:张经理。)
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