
Elispot-ELISPOT技术原理及其操作-实验步骤
德国bioreaderElispot德国biosysbioreaderElispot★顶部和底部双LED长效光源;★适用于双LED光源的3D光路系统;★摄像镜头,5MCCD;可针对分析96微孔板双色酶联斑点检测;前置进板方式,方便取放ELISPOT板;自动斑点大小识别技术(Auto-Size),辅助真实斑点自动计数;★自动边缘识别技术(Auto-Border),Elispot技术,确保识别全孔斑点;★局部斑点3D放大技术;★斑点光密度值分析和3D细胞印子分泌峰技术,可形成斑点细胞印子分泌量相对定量输出;★亚像素(Sub-Pixel)技术,增强斑点图像识别清晰度;2.3.7融合斑点自动分离识别技术和纤维去除技术;2.3.8图像自动居中、自动暴光、自动白平衡、自动光照调节等★2.3.9三种人工质控方式,可指丁单独斑点,指丁区域,或指丁标准斑点人工干预计数标准Elispot实验步骤与原理示意(示意图如下)大致原理上分为如下7个步骤,Elispot,详情已具体产品说明书为准Step.1包被:将单clone捕获Antibody添加到乙醇处理的PVDF膜板上Step.2细胞孵育:在有刺激的情况下加入细胞,孵育,细胞分泌***Step.3捕获分泌物:activation后的细胞,ELISPOT技术原理及其操作,分泌的***被周围的Antibody结合捕获Step.4检测Antibody:去除细胞,清洗平板,加入生物素化的检测AntibodyStep.5链霉亲和素-酶偶联物:加入链霉亲和素偶联物,保证后续在膜上形成斑点Step.6加反应底物:当酶催化时,显色底物形成不溶性沉淀Step.7结果分析:在自动点阅读器中对结果进行分析。每个斑点对应一个分析物分泌细胞Elispot解决的问题ELISPOT分析仪的出现解决了以下问题:哪些斑点是抗原特异性T细胞产生的(此斑点具有进一步分析价值),哪些是无关细胞产生的(此斑点没有T细胞研究价值)斑点大小的意义在对不同***计数和分析时,如何定义斑点MIN和MAX尺寸如何从单个细胞基础上分析实验accurate度有多高?如果一个细胞产生相似的***,在多大程度上会干扰分析结果?几次重复实验才能使结果更有意义?Elispot-ELISPOT技术原理及其操作-实验步骤由世联博研(北京)科技有限公司提供。世联博研(北京)科技有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工***,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。世联博研——您可信赖的朋友,公司地址:北京市昌平区回龙观镇上奥世纪中心2B座6层603,联系人:李经理。)