iPS细胞相关-友名生物公司(图)
细胞传代细胞密度达到80%~90%时.去培养基,10mlPBS清洗2次。加入3ml含0.25%EDTA的胰蛋白酶,放人细胞培养箱3min。加人1mlDMEM完全培养基终止胰酶消化,转移至15ml离心管。加入10mlPBS清洗细胞培养盘,转移至15ml离心管,2000rpmX2min,iPS细胞相关,弃上清液。再加入10mlPBS(经高压灭菌,保存于40C),吹匀,吸取10微升进行计数,按照1×106/盘接种,在含5%CO2的细胞培养箱继续培养。营养条件1.培养基细胞培养基包含细胞生长所需的各种营养物质,包括碳水化合物、氨基酸、无机盐、***等。针对不同细胞的营养需求,有多种合成培养基可供选择,如EBSS、Eagle、MEM、RPMll640、DMEM等。2.其他添加成分在各种合成培养基提供基础营养物质之外,还需根据不同细胞和不同的培养目的添加其他成分,如血1清、因子等。血1清提供的是细胞外基质、生长因子和转铁蛋白等重要物质,常用的是胎牛血1清。要根据不同的细胞和不同的研究目的决定添加血1清的比例。10%~20%的血1清能维持细胞较快的生长增殖速度,称为生长培养液;为维持细胞缓慢生长或不死,添加2%~5%的血1清即可,称为维持培养液。但血1清中也存在***于细胞生长和繁殖的物质,如补体、免1疫球蛋白和一些生长***因子;成分不明确,影响对结果的分析;不同动物、不同批次的血1清活性差别较大,影响培养效果的稳定性。谷氨酰胺是细胞生长重要的氮源,在细胞生长代谢过程中起重要作用,但由于谷氨酰胺在溶液中很不稳定容易降解,4℃下放置7天即可分解约50%,故谷氨酰胺需在使用前添加。细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移人15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10mlDMEM培养基清洗,弃上清液。加入10mlDMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5%CO2的细胞培养箱中培养。iPS细胞相关-友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是湖北武汉,其它的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在友名生物***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创友名生物更加美好的未来。)