T7 RNA聚合酶-友名生物公司(图)
长***组序列、特别是包含大的***簇的那些的克1隆对于产生medicine和生物燃料的合成生物学和***工程工作特别重要。传统的基于PCR的克1隆方法通常受限于DNA模板的长度和GC含量:标准的PCR反应常规产生至多10kb的片段,而更长的PCR产物需要反应条件的繁琐优化,并且甚至在理想条件下,通常受限于35kb5。或者,可通过装配多个短片段,例如重叠PCR产物或化学合成的DNA寡聚物,产生长的目的***组序列,但这样的方法趋于耗时和昂贵,特别是对于获得长于50kb的序列(其通常需要3-5阶段,每个包含多个装配事件)6,7。获得长的***组序列的另一方法是通过***组DNA的限制性酶消化。***组DNA部分片段化仪是一种用于化学、生物学领域的分析仪器。样本破碎方式:基于自动声波聚焦(AdaptiveFocusedAcoustic?,AFA)原理,利用几何聚焦声波能量,通过400kHz的球面固态超声传感器可将波长为3mm的声波能量聚焦在样品上。内置冷却系统,样品处理在等温下进行,无热损伤,提高样本回收率。能量可调且控制:超声波输出功率可自由调节;专门的软件参数控制及优化的Protocol,T7RNA聚合酶,可剪切出150bp-5kb的DNA部分片段。主要功能用于新一代***组测序的样本制备实验。该系统可实现由动植物材料至新一代测序上机样本制备整个过程,包括动植物材料的破碎,DNA或RNA的提取,DNA或RNA样本的机械化剪切,以及片段化后的DNA或RNA样本的回收。DNA连接酶主要用于产生新的核酸分子组合,及在将其连接到载体上这三个连续的步骤在连接酶的三个不同域进行,与双链DNA接触的各个域环绕DNA底物形成反应域。DNA连接酶主要用于产生新的核酸分子组合,以及在分子克1隆前将其连接到载体上。用于分子克1隆的DNA连接酶是***来源或者噬菌体编码。所有真***,无论是嗜热或嗜温,包含一个单一的连接酶***,编码NAD*-依赖型的酶(OliveraandLehman1967;Takahashietal.1984)。在连接反应的第yi步中,使用NAD的二磷酸作为磷酸1酐键和腺营基团转移到DNA连接酶赖氨酸残基的ε-氨基基团。腺苷酸残基然后转移到DNA底物的5-磷酰基末端,变得易于受到并列的3羟基基团的亲核攻击。这导致磷酸二酯键的形成,消去AMP,以及形成DNA链的共价连接。用于分子克1隆的DNA连接酶在连接非经典底物时能力有所不同,如平末端双链、DNA-RNA杂交体或单链DNA.这些以及其他的属性归纳于表5。分子克1隆中比较常用的催化体外连接的酶是T4噬菌体编码的DNA连接酶。T7RNA聚合酶-友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是从事“商务服务”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:董先生。)
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