随着***组测序、分子生物学检测手段的快速发展，PCR和荧光定量PCR实验，正在越来越多的实验室应用。然而，PCR作为一种高灵敏度的检测手段，PCR的实验结果也容易被各种无关的外源性DNA或RNA所干扰。PCR实验室中，很容易发生DNA的交叉污染，污染通常来自于离心管、移液器和其他试验设备产生的DNA气溶胶，或DNA溶液污染桌面，或吸样不慎将样品或模板核酸吸入内。据估算，一个气溶胶颗粒可含48000个DNA拷贝。因此，为保证PCR试验的数据准确，避免交叉污染，应定期对PCR实验室做DNA污染情况的监测。DNA提取过程中各种***的作用及原理溶液I—溶菌液：溶菌酶：它是糖苷水解酶，能水解菌体细胞壁的主要化学成分肽聚糖中的β-1，4糖苷键，因而具有溶菌的作用。当溶液中pH小于8时，小RNA表达载体，溶菌酶作用受到***。葡萄糖：增加溶液的粘度，维持渗透压，防止DNA受机械剪切力作用而降解。EDTA：(1)螯合Mg2+、Ca2+等金属离子，***脱氧核糖核酸酶对DNA的降解作用(DNase作用时需要一定的金属离子作辅基);(2)EDTA的存在，有利于溶菌酶的作用，因为溶菌酶的反应要求有较低的离子强度的环境。水中微生物DNA提取***盒，样本制备步骤。步骤1.样本过滤1.1从***盒中小心取出滤膜。用水样润湿滤膜。1.2将滤膜放置在滤器中，并过滤必要体积的水样。步骤2.菌体裂解*提前准备：预先将恒温仪设置到70℃，将恒温箱设置到37℃。2.1将样本过滤后的滤膜翻转放置到***盒提供的IncubationDish（平皿）中。2.2吸取2mllysisbuffer（裂解液），并加到滤膜上。2.3将滤膜浸泡在裂解液中，小心摇匀平皿并在37°C孵育30分钟。2.4用平皿中的裂解液冲洗滤膜，并摇晃平皿10秒钟。2.5将平皿中的400μl裂解液转移至IncubationTube（孵育管），70°C孵育10分钟。2.6样本短暂离心，并加入400μlBindingBuffer（结合液），立即涡旋充分混匀，以防止DNA沉淀。请勿离心样本，并立即进行下一步。步骤3.DNA提取3.1将步骤2.6中的混合液（~800μl）转移到CollectionTube（收集管）内的SpinColumn（离心柱）中，小心液体不要沾到离心柱的边缘。3.2离心柱离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.3离心柱中加入500μl洗液1。离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.4离心柱中加入500μl洗液2。离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。将离心柱插到一个新的收集管中。3.5***大速度离心3分钟，以去除残留的洗液2。3.6弃掉收集管。3.7吸取60μl已70℃预热的洗脱液，直接加到离心柱的硅胶膜上。硅胶膜表面应全部覆盖洗脱液。3.8室温静置2分钟，然后离心8000×g，2分钟，以洗脱DNA。3.9样本保存管中的洗脱液即包含DNA，可直接用于PCR，或储存在2~8℃，可存放1周。长期储存是在≤-18℃。小RNA表达载体-武汉友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是一家从事“商务服务”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“友名生物”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使友名生物在其它中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！)