内切酶-友名生物公司
限制酶分布区域限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有***的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆1菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低,很难分离定性;然而在有的菌株中,内切酶,酶含量极高.如E.coli的pMB4(EcoRI酶)和H.aegyptius(HalⅢ酶)就是高产酶菌株。据报道从10g的H.aegyptius的细胞中,能分离提纯出可消化l0gλ噬菌体DNA的酶量。***是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。蓝白斑筛选鉴定用于克1隆的酶还须通过额外的质量鉴定――蓝白斑筛选鉴定,以确定经酶过量消化后DNA末端的完整性。该种鉴定方法为:用酶10倍过量消化适当的载体上lacZ***中单一的酶切位点,连接,转化,并涂XGal/IPTG/Amp平板。成功地切割、连接和表达b-galactosidase可以说明克1隆后***是完整的,一个完整的***产生蓝斑,一个不完整的***(例如,降解的DNA末端)产生白斑。在进行蓝白斑鉴定中,所有的限制性内切酶产生的白斑数量不应超过3%。根据限制酶的结构,辅因子的需求切位与作用方式,可将限制酶分为三种类型,分别是第yi型(TypeI)、第二型(TypeII)及第三型(TypeIII)。第yi型限制酶同时具有修饰(modification)及认知切割(restriction)的作用;另有认知(recognize)DNA上特定碱基序列的能力,通常其切割位(cle***agesite)距离认知位(recognition)可达数千个碱基之远。例如:EcoB、EcoK。第二型限制酶只具有认知切割的作用,修饰作用由其他酵素进行。所认知的位置多为短的回文序列(palindromesequence);所剪切的碱基序列通常即为所认知的序列。是遗传工程上,实用性较高的限制酶种类。例如:EcoRI、HindIII。第三型限制酶与第yi型限制酶类似,同时具有修饰及认知切割的作用。可认知短的不对称序列,切割位与认知序列约距24-26个碱基对。例如:EcoPI、HinfIII。内切酶-友名生物公司由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是湖北武汉,其它的见证者,多年来,公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针,满足客户需求。在友名生物***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈,共创友名生物更加美好的未来。)