水中微生物DNA提取***盒，样本制备步骤。步骤1.样本过滤1.1从***盒中小心取出滤膜。用水样润湿滤膜。1.2将滤膜放置在滤器中，并过滤必要体积的水样。步骤2.菌体裂解*提前准备：预先将恒温仪设置到70℃，将恒温箱设置到37℃。2.1将样本过滤后的滤膜翻转放置到***盒提供的IncubationDish（平皿）中。2.2吸取2mllysisbuffer（裂解液），并加到滤膜上。2.3将滤膜浸泡在裂解液中，小心摇匀平皿并在37°C孵育30分钟。2.4用平皿中的裂解液冲洗滤膜，并摇晃平皿10秒钟。2.5将平皿中的400μl裂解液转移至IncubationTube（孵育管），70°C孵育10分钟。2.6样本短暂离心，并加入400μlBindingBuffer（结合液），立即涡旋充分混匀，以防止DNA沉淀。请勿离心样本，并立即进行下一步。步骤3.DNA提取3.1将步骤2.6中的混合液（~800μl）转移到CollectionTube（收集管）内的SpinColumn（离心柱）中，小心液体不要沾到离心柱的边缘。3.2离心柱离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.3离心柱中加入500μl洗液1。离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.4离心柱中加入500μl洗液2。离心≥10000×g，1分钟。弃掉收集管中的液体。将离心柱插到一个新的收集管中。3.5***大速度离心3分钟，以去除残留的洗液2。3.6弃掉收集管。3.7吸取60μl已70℃预热的洗脱液，直接加到离心柱的硅胶膜上。硅胶膜表面应全部覆盖洗脱液。3.8室温静置2分钟，然后离心8000×g，2分钟，以洗脱DNA。3.9样本保存管中的洗脱液即包含DNA，可直接用于PCR，或储存在2~8℃，可存放1周。长期储存是在≤-18℃。PCR产物的回收（胶回收***盒）1.胶回收的目的（1）去除非特异性扩增的产物（2）去除多余的底物（3）去除多余的Taq酶（4）得到目的片段2.胶回收的过程（1）切胶：紫外下切胶，称重。之后用头将胶块捣碎。切胶的刀片建议选用一次性刀片，实验台等也尽可能用乙醇擦拭干净。可通过空EP管与装胶EP管质量的差值计算胶的质量。注意切胶时尽可能避免切到条带外的凝胶，且避免紫外时间过长。别忘记胶条有厚度，前后多余的部分也尽量切除。（2）溶胶：每1mg胶加入1μL膜结合液（MB），按比例1:1加入MB，55℃水浴溶解。每1~2min震荡混匀，待溶解后至少在水浴中保持1~2min，保证胶块完全溶解。在电泳过程中，DNA会与大分子的多糖紧密结合，凝胶的种类和质量不同，DNA与之结合力也不同，只有凝胶充分溶解DNA才能充分释放。否则，凝胶将与DNA一起沉淀下来，洗脱后将影响回收结果的纯度。（3）结合：将溶胶转移至纯化柱内，mRNA纯化，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将纯化柱重新插回收集管中。胶块完全溶解后建议将胶液温度降至室温再上柱，因为纯化柱在温度较高时结合DNA的能力较弱。DNA提取过程中各种***的作用及原理溶液III--3mol/LNaAc(pH4.8)溶液：NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至4.8，必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性，使变性的质粒DNA能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol/LNaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相聚合.mRNA纯化-友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司在其它这一领域倾注了诸多的热忱和热情，友名生物一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场，衷心希望能与社会各界合作，共创成功，共创辉煌。相关业务欢迎垂询，联系人：董先生。)