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逆转录病毒滴度测定-友名生物公司
***法的优点是无宿主限制,受体类型广泛,操作迅速、简单,能有效地转化质体。由于取材广泛,金属微粒的喷射面广,转化频率高,逆转录病毒滴度测定,所以具有广泛的应用前景。缺点是转化的DNA部分片段太大时DNA部分片段容易断裂,***转化过程中,同源序列可通过DNA-DNA、DNA-RNA、RNA-RNA的相互作用,导致转录或转录后水平的***沉默。另外,外源DNA往往成簇地整合到受体***组中,而且可能以多种方式发生重排,所以转化体中的外源***常常是多拷贝的。但对于这些不足,目前已有研究者在研究其机理并寻求解决办法。腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒,在自然界分布广泛,至少存在100种以上的血1清型。其***组长约36kb,两端各有一个反向末端重复区(ITR),ITR内侧为病毒包装信号。***组上分布着4个早期转录元(E1、E2、E3、E4)承担调节功能,以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期***E2产物是晚期***表达的反式因子和copy必须因子,早期***E1A、E1B产物还为E2等早期***表达所必须。因此,E1区的缺失可造成病毒在copy阶段的流1产。E3为copy非必须区,其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型(Ad5)、2型(Ad2)为基础,新增了55型(Ad55),很多研究机构在研究当中,55型将比5型流行以及应用更具广泛性。电1击法电1击法基本原理是电脉冲使细胞膜产生可逆性的“微孔”,外源DNA可通过这些微孔进入受体细胞原生质体内。1985年Fromm等用electricshock法将pat***导入了玉米原生质体,得到了该***稳定表达的愈伤***。随着玉米原生质体再生技术的研究取得进展,1988年Rhodes等用electricshock法转化玉米原生质体,初步获得了完整的转0***植株。electricshock法还可以对幼胚、愈伤***和胚性悬浮细胞系进行遗传转化。1992年D’HallumK等以玉米幼胚和愈伤***为受体,用electricshock法导入neo***,获得了可育的转0***植株,并且neo***能稳定地遗传给后代。1993年Sukhapinda等用electricshock法转化从玉米花粉愈伤***分离的原生质体,将gusA和nptⅡ转入原生质体,获得单倍体转化植株。1994年Laursen等以果胶降解酶处理悬浮细胞系后,通过electricshock法导入bar***,也获得了可育的转0***玉米。电1击法操作简单,不受宿主限制,在遗传转化技术研究的初期得到了较为广泛的应用,但是它的转化效率较低,而且对有壁细胞或***的转化效果较差。逆转录病毒滴度测定-友名生物公司由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)