快切酶-武汉友名生物公司(图)
限制酶分布区域限制性核酸内切酶分布极广,几乎在所有***的属、种中都发现至少一种限制性内切酶,多者在一属中就有几十种,例如在嗜血杆1菌属中(Haemophilus)现已发现的就有22种。有的菌株含酶量极低,快切酶,很难分离定性;然而在有的菌株中,酶含量极高.如E.coli的pMB4(EcoRI酶)和H.aegyptius(HalⅢ酶)就是高产酶菌株。据报道从10g的H.aegyptius的细胞中,能分离提纯出可消化l0gλ噬菌体DNA的酶量。***是限制性内切酶,尤其是特异性非常强的I类限制性内切酶的主要来源。限制性内切酶对环状质粒DNA产生的酶切片段数与切口数一致。因此,鉴定酶切后的片段在电泳凝胶的区带数,就可以推断切口的数目;从片段迁移率可判断酶切片段大小。用已知分子量的线状DNA为对照,通过电泳迁移率的比较,可以粗略地测出分子形状相同的未知DNA的相对分子大小。质粒DNA的相对分子量(Mr)一般在106~107范围内,如质粒pBR的相对分子质量为2.8×106,在细胞内有三种构型:①共价闭环DNA,常以超螺旋形式存在;②如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂,分子就能旋转而消除链的张力,这种松弛型的分子叫作开环DNA;③双链线状DNA由于两条链的切口在同一部位被切断,不能成环,完全开放成线状,简称线性DNA。如果要测定质粒DNA的相对分子量,建议把质粒用单一切口的酶水解得到线性DNA部分片段。三种构型的质粒DNA在电泳时的泳动速度为:共价闭环DNA>线状DNA>开环DNA。限制酶有什么作用?在DNA重组技术中,限制酶主要用于:1.在特异位点上切割DNA,产生特异的限制酶片段;2.建立DNA分子的限制酶图谱;3.构建***文库;4.用限制酶切出的相同的粘性末端,以便重组。5.许多***用切割外来DNA的方法进行自我保护,如切割感1染性噬菌体的DNA.这些***产生一种能切割DNA的核酸内切酶,一旦发现外来DNA便将其切割,因此它们有效地限制了噬菌体对***的感1染,故这种核酸内切酶被称为限制酶.6.每种限制酶特异识别专一DNA序列,并在切割位点将其准确切割.快切酶-武汉友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)
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