目前的病毒核酸检测***盒，多数采用荧光定量PCR方法，通过检测荧光信号的累积来确定样本中是否含有病毒核酸。那么，核酸检测到底需要经过哪些步骤呢？概括起来，是取样、留样、保存、核酸提取和上机检测五个步骤。取样采集***的分泌物。用鼻咽拭子或咽拭子擦拭鼻腔或咽后壁及双侧扁桃体处留样将拭子头浸入细胞保存液中，折断尾部后立即旋紧管盖保存将样本管放入密封袋中保存好，并及时送检核酸提取将样本送进实验室进行核酸提取上机检测将提取物进行荧光PCR扩增反应污染的监测一个好的实验室，要时刻注意污染的监测，考虑有无污染是什么原因造成的污染，以便采取措施，防止和消除污染。1、阳性对照：在建立PCR反应实验室及一般的检验单位都应设有PCR阳性对照，它是PCR反应是否成功、产物条带位置及大小是否合乎理论要求的一个重要的参考标志。阳性对照要选择扩增度中等、重复性好，经各种鉴定是该产物的标本，如以重组质粒为阳性对照，其含量宜低不宜高（100个拷贝以下）。但阳性对照尤其是重组质粒及高浓度阳性标本，其对检测或扩增样品污染的可能性很大。因而当某一PCR***经自己使用稳定，检验人员心中有数时，在以后的实验中可免设阳性对照。2、阴性对照：每次PCR实验务必做阴性对照。它包括：（1）标本对照：被检的标本是血1清就用鉴定后的正常血1清作对照；被检的标本是***细胞就用相应的***细胞作对照。（2）***对照：在PCR***中不加模板DNA或RNA，进行PCR扩增，以监测***是否污染。3、重复性试验。4、选择不同区域的引物进行PCR扩增。污染原因：1、标本间交叉污染：标本污染主要有收集标本的容器被污染，或标本放置时，由于密封不严溢于容器外，或容器外粘有标本而造成相互间交叉污染；标本核酸模板在提取过程中，由于吸样污染导致标本间污染；有些微生物标本尤其是病毒可随气溶胶或形成气溶胶而扩散，导致彼此间的污染。2、PCR***的污染：主要是由于在PCR***配制过程中，由于加样、容器、双蒸水及其它溶液被PCR核酸模板污染。3、PCR扩增产物污染：这是PCR反应中主要常见的污染问题。因为PCR产物拷贝量大（一般为1013拷贝/ml），远远高于PCR检测数个拷贝的极限，所以极微量的PCR产物污染，就可形成假阳性。还有一种容易忽视，可能造成PCR产物污染的形式是气溶胶污染。在空气与液体面摩擦时就可形成气溶胶，在操作时比较剧烈地摇动反应管，开盖时、吸样时及污染进样的反复吸样都可形成气溶胶而污染。据计算一个气溶胶颗粒可含48000拷贝，因而由其造成的污染是一个值得特别重视的问题。4、实验室中质粒的污染：在分子生物学实验室及某些用质粒做阳性对照的检验室，这个问题也比较常见。因为质粒在单位容积内含量相当高，预混PCR酶，另外在纯化过程中需用较多的用具及***，而且在内的质粒，由于的生长繁殖的简便性及具有很强的生命力。其污染可能性也很大。预混PCR酶-友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司坚持“以人为本”的企业理念，拥有一支高素质的员工***，力求提供更好的产品和服务回馈社会，并欢迎广大新老客户光临惠顾，真诚合作、共创美好未来。友名生物——您可信赖的朋友，公司地址：湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701，联系人：董先生。)