快切酶-友名生物技术(图)
限制性内切酶的质量控制鉴定限制性内切酶的一个活性单位是指,在50μl的反应体系里,采用随酶提供的NEBuffer,用1个小时的时间,快切酶,消化1μg底物DNA所需要的酶量。酶切反应应在带盖的eppendorf管中进行,选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前,浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1,000单位/ml。质量控制所有质量控制鉴定结果都公布在随酶提供的技术数据卡上。限制性内切酶已有百余种,每种酶有其特定的核苷酸序列识别特异性,酶的活性需Mg+2来激1活。不同的酶也有许多差别:有些酶除需Mg+2外,还需ATP等其他辅助因子的激1活;切割位点和识别序列间的距离不同;有的内切酶同时具有甲1基化作用。根据这些差别,可将限制性内切酶分为I、II和III种类型。II型限制性内切酶只需要二价镁离子的激1活,酶在其识别序列内切割双链DNA,产生的各种DNA部分片段具有相同的末端结构,而且大多数的II型酶可提供粘性未端,有利于片段再连接,大部分II型酶所识别的序列具有反向对称的结构,或称之回文结构。如EcoRI和HindIII的识别和切口分别为:EcoRI:G↓AATTCHindIII:A↓AGCTTTTCGA↑ACTTAA↑G一般是以微生物属名的第yi个字母和种名的前两个字母组成,第四个字母表示菌株(品系)。例如,从Bacillusamy***iquefaciensH中提取的限制性内切酶称为BamH,在同一品系***中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶,可以编成不同的号,如HindⅡ、HindⅢ,HpaI、HpaⅡ,MboI、MboⅡ等。别名:restrictionendonuclease简称限制酶酶反应:限制性内切酶能分裂DNA分子在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。单位定义:在指明pH与37℃,在0.05mL反应混合物中,1小时消化1μg的λDNA的酶量为1单位。性状制品不含非专一的核酸水解酶(由10单位内切酶与1μgλDNA,保温16小时所得的凝胶电泳图谱的稳定性表示),这类酶主要是从原核生物中分离出来的,迄今已经从近300多种不同的微生物中分离出约4000种限制酶。快切酶-友名生物技术(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)
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