几种酶的比较及限制酶1几种酶的比较(1)限制性内切酶:作用于DNA分子，切割磷酸二酯键，形成黏性末端或平末端。(2)DNA连接酶:作用于DNA分子片段，连接磷酸二酯键，形成重组DNA分子。(3)DNA聚合酶:作用于脱氧核苷酸，内切酶，连接磷酸二酯键，形成新的DNA分子。(4)解旋酶:作用于DNA分子，作用于氢键，形成DNA分子的单链。2.限制酶:(1)一种限制酶通常只识别一种特定的碱基序列，但是有少数限制酶却可以识别不止一种碱基序列。(2)不同限制酶也可以识别同-碱基序列;(3)不同限制酶识别的碱基序列虽然不同，但切出的末端也可能相互连接。质粒载体和外源ＤＮＡ中限制酶切位点的性质如今，质粒载体中限制酶切位点的种类极为繁多，因而通常都有可能找到某种带限制酶切位点恰恰与外源ＤＮＡ部分片段本身毫无二致的载体。这就具备一个不可1比拟的优点，也应是可以用相应的限制酶消化重组质粒崦回收外源ＤＮＡ。另一种方案，则是把片段插入到载体中能产生匹配末端的任何位点中。例如，识别不同的六核苷酸的限制酶BamHl和BglⅡ产生具有相同突出末端的限制酶切片段，这样用BglⅡ消化而制备的外源ＤＮＡ部分片段可以克1隆到用BanHl消化的质粒中。这通常会使接合序列不能被曾用于外源ＤＮＡ或制备载体的任何一种酶所切开。然而很多清况下，用切点位于多克1隆序列侧翼的限制酶进行消化，可将片段从重组质粒中摘出。偶尔在质粒的以及外源ＤＮＡ两端的限制酶切位点之间，不可能找到“门当户对”的搭配关系。这时可用下面两种方案加以解决：1）在线状质粒末端和（或）外源ＤＮＡ部分片段的末端接上合成在接头或衔接头。2）在得到控制的反应条件下，用大肠杆1菌ＤＮＡ聚合酶IＫlenow片段部分补平带3凹端的ＤＮＡ部分片段。如第九章所讨论，这样常可以使那些不相匹配的限制酶切位点转变为互补末端，从而促进载体和外源ＤＮＡ的连接。因为部分补平的反应消除了同一分子两端彼此配对的能力，故连接反应过程中环化和自身寡聚化的机会也会有所降低一般是以微生物属名的第yi个字母和种名的前两个字母组成，第四个字母表示菌株（品系）。例如，从Bacillusamy***iquefaciensH中提取的限制性内切酶称为BamH，在同一品系***中得到的识别不同碱基顺序的几种不同特异性的酶，可以编成不同的号，如HindⅡ、HindⅢ，HpaI、HpaⅡ，MboI、MboⅡ等。别名：restrictionendonuclease简称限制酶酶反应：限制性内切酶能分裂DNA分子在一限定数目的专一部位上。它能识别外源DNA并将其降解。单位定义：在指明pH与37℃，在0.05mL反应混合物中，1小时消化1μg的λDNA的酶量为1单位。性状制品不含非专一的核酸水解酶（由10单位内切酶与1μgλDNA，保温16小时所得的凝胶电泳图谱的稳定性表示），这类酶主要是从原核生物中分离出来的，迄今已经从近300多种不同的微生物中分离出约4000种限制酶。内切酶-友名生物技术(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗，信誉可靠，在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)