Bradford蛋白质定量***-武汉友名生物
工业应用领域①皮革脱毛:酶脱毛(50-55℃,PH7.0-8.0,20—25u/ml)→水洗→浸酸→鞣制。②胶片回收银:50℃,PH9.5-10.5,用20—23u/ml进行回收。③丝绸脱胶:预处理→脱水→酸处理(蛋白酶18—24u/ml,肥皂0.75%,48—50℃,30—60分钟,PH7—8)→脱水→扯皮→冲洗→脱水→抖松→烘干→抖松。④饲料加工的应用:该酶与α—淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、糖化酶等复合使用。可广泛应用于仔猪、育成猪、禽类、鱼类的饲喂,可将酶制剂加入饲料后,人为的控制温度、湿度、PH和作用时间,使物料在酶的作用下得到一定程度的降解。小规模饲养时可将酶制剂直接添加到饲料中,经充分拌和后饲喂畜禽,拌和时应采用逐步扩大的拌和方法,以保证酶在饲料中的均匀分布。通常用量为饲料的0.1—1.0%。蛋白质含量测定方法之双缩脲法(biuret法)实验原理双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:***铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分准确的蛋白质测定。folin―酚***法早先是由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生***学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高,比双缩脲法灵敏得多,缺点是费时间较长,要准确控制操作时间,Bradford蛋白质定量***,标准曲线也不是严格的直线形式,且专一性较差,干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子,同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、***铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素(0.5%),***纳(1%),NaNO浓度(1%),TCA(0.5%),乙醇(5%),***H10O(5%),CH3COCH3(0.5%)等溶液对显色无影响,但这些物质浓度高时,必须作校正曲线。含***铵的溶液,只须加浓碳酸钠―NaOH溶液,即可显色测定。若样品酸度较高,显色后会色浅,则必须提高碳酸钠―NaOH溶液的浓度1~2倍。Bradford蛋白质定量***-武汉友名生物由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司拥有很好的服务与产品,不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员,点击页面的商盟***图标,可以直接与我们***人员对话,愿我们今后的合作愉快!)
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