差示PCR(differentialPCR，d-PCR)技术d-PCR可以定量检测标本靶***的拷贝数。它是将目的***和一个单拷贝的参照***置于一个试管中进行PCR扩增。电泳分离后呈两条区带，比较两条区带的丰度，或在引物5°-端标记上放1射性核素后.通过检测两条区带放1射性强度即可测出目的***的拷贝数。定量PCR(quantitativePCR，qPCR)技术qPCR技术是用合成的RNA作为内标来检测PCR扩增目的mRNA的量，涉及目的mRNA和内标用相同的引物共同扩增.但扩增出不同大小片段的产物.可容易地电泳分离。一种内标可用于定量多种不同目的mRNA。qPCR可用于研究***表达。能提供特定DNA***表达水平的变化.在***1症、代谢紊乱及自身免1疫性***的诊断和分析中很有价值。PCR技术的基本原理PCR技术是在模板DNA、引物和四种dNTP等存在的条件下.依赖于DNA聚合酶(Taq酶)的酶.促合成反应。其具体反应分三步:变性、退火、聚合。以上三步为一个循环，每一循环的产物DNA又可以作为下一个循环模板，数小时后，介于两个引物之间的目的DNA得到了大量的copy，经25~30次循环DNA数量可达2x1067拷贝数。锚定PCR(AnchoredPCR.APCR技术.用酶法在一通用引物反转录cDNA3-末端加上一段已知序列，粗提物定量PCR***，然后以此序列为引物结合位点对该cDNA进行扩增，称为APCR.应用:它可用于扩增未知或全知序列，如未知cDNA的制备及低丰度cDNA文库的构建。等位***特异性PCR(Allele-specificPCR.ASPCR技术ASPCR依赖于引物3”-端的一个碱基错配，不仅减少多聚酶的延伸效率，而且降低引物-模板复合物的热稳定性。这样有点突变的模板进行PCR扩增后检测不到扩增产物.可用于检测***点突变。单链构型多态性PCR(single-strandconformationalpolymorphi***PCR，***PPCR)技术***P-PCR是根据形成不同构象的等长DNA单链在中性聚丙1烯酰胺凝胶中的电泳迁移率变化来检测***变异。在不含变性剂的中性聚丙1烯酰胺凝胶中，单链DNA迁移率除与DNA长度有关外，更主要取决于DNA单链所形成的空间构象。相同长度的单链DNA因其顺序不同或单个碱基差异所形成的构象就会不同，PCR产物经变性后进行单链DNA凝胶电泳时，每条单链处于一定的位置.靶DNA中若发生碱基缺失、插入或单个碱基置换时.就会出现泳动变位。从而提示该片段有***变异存在。粗提物定量PCR***-友名生物技术(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是从事“商务服务”的企业，公司秉承“诚信经营，用心服务”的理念，为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询！联系人：董先生。)