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胰蛋白酶Trypsin(Parenzyme)为蛋白酶的一种,EC3.4.21.4。在脊椎动物中,作为消化酶而起作用。在胰脏是作为酶的前体胰蛋白酶原而被合成的。作为胰液的成分而分泌,受肠激酶,或胰蛋白酶的限制分解成为活化胰蛋白酶,是肽链内切酶,它能把多肽链中赖氨酸和精氨酸残基中的羧基侧切断。它不仅起消化酶的作用,而且还能限制分解糜蛋白酶原、羧肽酶原、磷脂酶原等其它酶的前体,起活化作用。是特异性***强的蛋白酶,在决定蛋白质的氨基酸排列中,它成为不可缺少的工具。目前,传统的获得多***转基yin植株的方法包括共转化,再转化W及杂交。但是运些传统方法的缺点是共转化的两个或多个***的转化效率是不可控的,每个***在目标***组的插入位置也是不一样的,WB封闭液,而***分离会导致不稳定的遗传后代。另外再转化W及杂交都是耗时的过程。而为了克服运些缺点,具有单个或者多个转录盒子的多***载体应运而生并成功应用于多个研究,但是运些多***表达载体的应用没有得到广泛的推广应用。因为大部分的方法需要亚克1隆W至于克1隆所耗时间拉长;没有标签或者报告***与目标***相连,运样就导致蛋白或者***的鉴定比较困难;另外,某些方法如采用同尾酶构建多***载体的方法受限于可用的酶的数量不多运个问题。所W构建多***载体需要根据研究目的而设计。蛋白质含量测定方法之双缩脲法(biuret法)实验原理双缩脲(NH3CONHCONH3)是两个分子脲经180℃左右加热,放出一个分子氨后得到的产物。在强碱性溶液中,双缩脲与CuSO4形成紫色络合物,称为双缩脲反应。凡具有两个酰胺基或两个直接连接的肽键,或能过一个中间碳原子相连的肽键,这类化合物都有双缩脲反应。紫色络合物颜色的深浅与蛋白质浓度成正比,而与蛋白质分子量及氨基酸成分无关,故可用来测定蛋白质含量。测定范围为1-10mg蛋白质。干扰这一测定的物质主要有:***铵、tris缓冲液和某些氨基酸等。此法的优点是较快速,不同的蛋白质产生颜色的深浅相近,以及干扰物质少。主要的缺点是灵敏度差。因此双缩脲法常用于需要快速,但并不需要十分准确的蛋白质测定。WB封闭液-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是从事“商务服务”的企业,公司秉承“诚信经营,用心服务”的理念,为您提供更好的产品和服务。欢迎来电咨询!联系人:董先生。)
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