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棉花等酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:1取2g新鲜幼嫩的叶片放入研钵中,加入液氮后快速、充分研磨,待成极细的粉末状时迅速转入到50ml离心管中。2在50ml离心管中加入10ml冰预冷的提取缓冲液,在涡悬振荡器上充分混匀。3于4℃,2700×g离心20分钟,倒去上清液。4在沉淀中加入5ml裂解缓冲液,在涡旋振荡器上充分混匀。5于65℃水浴锅中温育30min。6加入5ml氯1仿/异戊1醇(24/1),并上下翻转以充分混合。7于4℃,2700×g离心5分钟。8转移上层水相至一新的50ml离心管中。9重复步骤7-9一次。10加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇,并上下翻转以充分混合,至-20℃2h。11于4℃,1200×g离心10min。12在一新管中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液,宏***组建库***盒,用玻棒将DNA转入该管(如不能直接用玻棒缠出,可离心后倒出上清,再在其中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液),放置20min后稍许离心,移走上清并吸出残存乙醇,室温干燥。13加入10mlTE(10mmol/LTris-HClPH=80,1mmol/LEDTA)并加入终浓度为20(g/L的RNaseA,过夜。14风干,用50μlTE缓冲液溶解,存于-20℃备用。水中微生物DNA提取***盒,样本制备步骤。步骤1.样本过滤1.1从***盒中小心取出滤膜。用水样润湿滤膜。1.2将滤膜放置在滤器中,并过滤必要体积的水样。步骤2.菌体裂解*提前准备:预先将恒温仪设置到70℃,将恒温箱设置到37℃。2.1将样本过滤后的滤膜翻转放置到***盒提供的IncubationDish(平皿)中。2.2吸取2mllysisbuffer(裂解液),并加到滤膜上。2.3将滤膜浸泡在裂解液中,小心摇匀平皿并在37°C孵育30分钟。2.4用平皿中的裂解液冲洗滤膜,并摇晃平皿10秒钟。2.5将平皿中的400μl裂解液转移至IncubationTube(孵育管),70°C孵育10分钟。2.6样本短暂离心,并加入400μlBindingBuffer(结合液),立即涡旋充分混匀,以防止DNA沉淀。请勿离心样本,并立即进行下一步。步骤3.DNA提取3.1将步骤2.6中的混合液(~800μl)转移到CollectionTube(收集管)内的SpinColumn(离心柱)中,小心液体不要沾到离心柱的边缘。3.2离心柱离心≥10000×g,1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.3离心柱中加入500μl洗液1。离心≥10000×g,1分钟。弃掉收集管中的液体。重新将离心柱插到原有的收集管中。3.4离心柱中加入500μl洗液2。离心≥10000×g,1分钟。弃掉收集管中的液体。将离心柱插到一个新的收集管中。3.5***大速度离心3分钟,以去除残留的洗液2。3.6弃掉收集管。3.7吸取60μl已70℃预热的洗脱液,直接加到离心柱的硅胶膜上。硅胶膜表面应全部覆盖洗脱液。3.8室温静置2分钟,然后离心8000×g,2分钟,以洗脱DNA。3.9样本保存管中的洗脱液即包含DNA,可直接用于PCR,或储存在2~8℃,可存放1周。长期储存是在≤-18℃。甘油三酯(TG)检测***盒(比色法),#KTB2200:用异丙1醇抽提取TG,KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸,Periodicacid氧化甘油生成甲醛,在氯离子存在下甲醛与Acetylacetone缩合生成***物质,在420nm有特征吸收峰,其颜色的深浅与TG含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测动物***、细胞、serum(浆)以及植物样本中甘油三酯(TG)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。游离胆固醇(FC)检测***盒(比色法),#KTB2210:胆固醇氧化酶催化游离胆固醇(FC)生成△4-胆甾烯酮和H2O2,过氧化物酶催化H2O2、4-氨基安替比林和酚生成红色醌类化合物,在500nm有吸收峰,其颜色深浅与FC含量成正比。该***盒提供了一种简单的检测方法检测生物样本如动物***、细胞(***)、serum(浆)中游离胆固醇(FC)的含量水平;而且细致优化了样本处理方法、实验操作流程以及结果计算过程。宏***组建库***盒-武汉友名生物(在线咨询)由武汉友名生物技术有限公司提供。宏***组建库***盒-武汉友名生物(在线咨询)是武汉友名生物技术有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:董先生。)
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