棉花等酚类、多糖类物质较多的植物ＤＮＡ提取法：1取2ｇ新鲜幼嫩的叶片放入研钵中，加入液氮后快速、充分研磨，待成极细的粉末状时迅速转入到50ｍｌ离心管中。2在50ｍｌ离心管中加入10ｍｌ冰预冷的提取缓冲液，在涡悬振荡器上充分混匀。3于4℃，2700×ｇ离心20分钟，倒去上清液。4在沉淀中加入5ｍｌ裂解缓冲液，在涡旋振荡器上充分混匀。5于65℃水浴锅中温育30ｍｉｎ。6加入5ｍｌ氯1仿/异戊1醇(24/1)，并上下翻转以充分混合。7于4℃，2700×ｇ离心5分钟。8转移上层水相至一新的50ｍｌ离心管中。9重复步骤7-9一次。10加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇，并上下翻转以充分混合，至-20℃2ｈ。11于4℃，1200×ｇ离心10ｍｉｎ。12在一新管中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液，用玻棒将ＤＮＡ转入该管(如不能直接用玻棒缠出，可离心后倒出上清，再在其中加入20ｍｌ含80%乙醇15ｍｍｏｌ/ＬＮａＡｃ溶液)，放置20ｍｉｎ后稍许离心，移走上清并吸出残存乙醇，室温干燥。13加入10ｍｌＴＥ(10ｍｍｏｌ/ＬＴｒｉｓ-ＨＣｌＰＨ=80，1ｍｍｏｌ/ＬＥＤＴＡ)并加入终浓度为20(ｇ/Ｌ的ＲＮａｓｅＡ，过夜。14风干，用50μｌＴＥ缓冲液溶解，存于-20℃备用。随着***组测序、分子生物学检测手段的快速发展，PCR和荧光定量PCR实验，正在越来越多的实验室应用。然而，PCR作为一种高灵敏度的检测手段，PCR的实验结果也容易被各种无关的外源性DNA或RNA所干扰。PCR实验室中，很容易发生DNA的交叉污染，污染通常来自于离心管、移液器和其他试验设备产生的DNA气溶胶，或DNA溶液污染桌面，或吸样不慎将样品或模板核酸吸入内。据估算，一个气溶胶颗粒可含48000个DNA拷贝。因此，为保证PCR试验的数据准确，避免交叉污染，应定期对PCR实验室做DNA污染情况的监测。为什么用无水乙醇沉淀DNA用无水乙醇沉淀DNA，这是实验中较常用的沉淀DNA的方法。乙醇的优点是可以任意比和水相混溶，乙醇与核酸不会起任何化学反应，对DNA很安全，因此是理想的沉淀剂。DNA溶液是DNA以水合状态稳定存在，当加入乙醇时，乙醇会夺去DNA周围的水分子，RNA上样缓冲液，使DNA失水而易于聚合。一般实验中，是加2倍体积的无水乙醇与DNA相混合，其乙醇的***终含量占67%左右。因而也可改用95%乙醇来替代无水乙醇(因为无水乙醇的价格远远比95%乙醇昂贵)。但是加95%的乙醇使总体积增大，而DNA在溶液中有一定程度的溶解，因而DNA损失也增大，尤其用多次乙醇沉淀时，就会影响收得率。折中的做法是初次沉淀DNA时可用95%乙醇代替无水乙酵，后面的沉淀步骤要使用无水乙醇。也可以用0.6倍体积的异丙1醇选择性沉淀DNA。一般在室温下放置15-30分钟即可。RNA上样缓冲液-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司拥有很好的服务与产品，不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员，点击页面的商盟***图标，可以直接与我们***人员对话，愿我们今后的合作愉快！)