如何确认RNA的质量实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估***的活力。RNA样本提取的质量直接影响***表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种：RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：紫外分光光度计法：测量260nm吸收值计算RNA浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估RNA纯度。需要注意的是：在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。260nm/280nm的比值范围在1.9~2.1之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明RNA可能发生降解。琼脂糖凝胶电泳：完整的RNA通常有三条带，***亮的是28S条带，其次是18S条带，***淡的是5S条带（部分***盒提取时会过滤掉5S条带）。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利，28S的亮度在18S条带的两倍以上，我们认为RNA的质量***好。若RNA条带出现弥散，原因可能：RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。转移RNA转移RNA（tRNA）在蛋白质合成过程中负责转运氨基酸、解读mRNA遗传密码。tRNA占细胞总RNA的10%~15%，绝大多数位于细胞质中。tRNA由Crick于1955年提出其存在，Zamecnik和Hoagland于1957年鉴定。tRNA一级结构具有以下特点：①是一类单链小分子RNA，长73~95nt（共有序列76nt），沉降系数4S。②是含稀有碱基***多的RNA，含7-15个稀有碱基（占全部碱基的15%~20%），病原菌检测，位于非配对区。③5′末端碱基往往是鸟piao呤。④3端是CCA序列，其中的腺苷酸常称为A76，其3’—OH是氨基酸结合位点。【从植物材料或植物培养细胞中提取***组DNA】①按下表称取适量的新鲜植物材料（如选用的是冷冻干燥植物材料，则用量减半），剪成小块放入研钵中，加入液氮，待样品冷冻完全后快速、用力研磨至粉末状。研磨时应间断加入液氮以防止材料融化。植物材料使用量植物花、叶片10～100mg植物茎60～240mg植物根80～240mg植物种子80～240mg如选取植物的根、种子等样品时，因其***组DNA含量很低，需使用超过表格中所示的参数用量，此时请分两管进行步骤1～6的实验操作，在步骤7的操作中再将各管溶液分次加入至同一SpinColumn中过滤，使各管的***组DNA结合到同一个SpinColumn上。如从培养的植物细胞中提取***组DNA，请离心收集2×103～1×107的培养植物细胞，加入150μl水充分悬浮细胞后移入研钵中，加入液氮后快速、用力研磨至粉末状。注）样品研磨应充分，否则将会严重影响***组DNA的收率。②将研钵移至65℃水浴，当样品粉末刚开始融化时，向研钵中加入700μl的SolutionA和1.2μl的RNaseA1，用力碾磨30秒。③收集650μl研磨好的***匀浆移至CollectionTube中。如匀浆体积不足650μl，请补充SolutionA至650μl。65℃保温15分钟。注）处理富含纤维的根/茎等植物材料或富含淀粉、蛋白质的种子等时，可延长水浴时间至60分钟。病原菌检测-友名生物技术(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。“商务服务”选择武汉友名生物技术有限公司，公司位于：湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701，多年来，友名生物坚持为客户提供好的服务，联系人：董先生。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。友名生物期待成为您的长期合作伙伴！)