LAPCR的原理LAPCR的关键是具有3′→5′Exonuclease活性(Proofreading活性)的耐热性DNA聚合酶。在PCR过程中当有错误的碱基摄入时，反应性能将大幅度下降，TaKaRaExTaq和TaKaRaLATaq依靠3′→5′Exonuclease活性可将错配的碱基除去，从而延伸反应能顺利地进行下去，使长链DNA的扩增成为可能。PCR有哪些应用领域？***表达通常可通过PCR来检测不同细胞类型、***和生物体在特定时间点的***表达差异。首先，从目标样品中分离出RNA并将mRNA逆转录成cDNA。随后，通过由PCR扩增的cDNA数量，确定mRNA的初始水平。这一过程也被称为逆转录PCR。终点PCR可通过凝胶里的扩增产物条带强度对RNA的表达进行定量（一种半定量方法）。例如，对起始cDNA进行连续稀释并扩增。通过凝胶电泳使不同起始量的终点PCR得率可视化，然后对条带强度进行定量，并以管家***为参照进行标准化，预估扩增靶点的相对表达水平。如今，终点PCR已基本被实时PCR或qPCR取代了，因为它们可获得和的***表达定量结果。PCR反应五要素参加PCR反应的物质主要有五种即引物(PCR引物为DNA部分片段，细胞内DNA复1制的引物为一段RNA链)、酶、dNTP、模板和缓冲液(其中需要Mg2+)。[PCR步骤]标准的PCR过程分为三步:1.DNA变性(90°C-96*C):双链DNA模板在热作用下，氢键断裂，形成单链DNA2.退火(25C-65C):系统温度降低，引物与DNA模板结合，形成局部双链。3.延伸(70°C-75*C):在Taq酶(在72C左右，活性***佳)的作用下，以dNTP为原料，从引物的5端→3端延伸，Taq酶，合成与模板互补的DNA链。每一循环经过变性、退火和延伸，DNA含量即增加一倍。现在有些PCR因为扩增区很短，即使Taq酶活性不是***佳也能在很短的时间内copy完成，因此可以改为两步法，即退火和延伸同时在60°C-65C间进行，以减少一次升降温过程，提高了反应速度。友名生物(多图)-Taq酶由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司位于湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前友名生物在其它中享有良好的声誉。友名生物取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。友名生物全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)