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细胞冻存步骤1.用移液器吸走原培养基,加入适量PBS洗1-2遍;2.加入适量胰酶,置于培养箱中消化;3.待消化到位后加入适量血浆或完全培养基终止消化,800-1000rpm离心3-5min;4.配制冻存液,待细胞离心后去上清,加入冻存液重悬,调整细胞浓度为3×106~1×107cells/mL,转移到冻存管中;5.将冻存管放入程序降温盒中,-80度过夜,然后转移到液氮中保存。6.冻存细胞后应取出一管复苏,检测细胞的存活率。理论上细胞可在液氮内长期保存,为稳妥起见可在细胞冻存半年后复苏培养,观察细胞生长情况,再继续冻存冻存袋使用注意事项1.取细胞的过程中注意带好防冻手套,护目镜。此项尤为重要,细胞冻存管可能漏入液氮,解冻时冻存管中的气温急剧上升,可导致。2.冻存液的问题:冻存液的配置已是常识,在这里不作详述,200-074-400冻存袋价格,但二亚砜(DMSO)对细胞不是完全,在常温下,CS50冻存袋价格,二亚砜对细胞的毒副作较大,冻存袋价格,因此,必须在1-2min内使冻存液完全融化。如果复苏温度太慢,会造成细胞的损伤,二亚砜(DMSO)选择进口产品。3.离心前须加入少量培养液。细胞解冻后二亚砜浓度较高,注意加入少量培养液可稀释其浓度,以减少对细胞的损伤。冻存袋的背景知识采用慢冻快融的方法能较好地保证细胞存活。标准冷冻速度开始为-1到-2℃/min,当温度低于-25℃时可加速,到-80℃之后可直接投入液氮内(-196℃)。细胞冻存及复苏的基本原则是慢冻快融,实验证明这样可以的保存细胞活力。如今细胞冻存多采用甘油或二亚砜作保护剂,这两种物质能提高细胞膜对水的通透性,加上缓慢冷冻可使细胞内的水分渗出细胞外,减少细胞内冰晶的形成,从而减少由于冰晶形成造成的细胞损伤。CS50冻存袋价格-冻存袋价格-北京思齐生物有限公司(查看)由北京思齐生物技术有限公司提供。北京思齐生物技术有限公司拥有很好的服务与产品,不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员,点击页面的商盟***图标,可以直接与我们***人员对话,愿我们今后的合作愉快!)
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