***导入细胞常用方法转染重组的噬菌体DNA也可象质粒DNA的方式进入宿主菌，即宿主菌先经过C***2，电穿孔等处理成感受态***再接受DNA，进入感受态***的噬菌体DNA可以同样copy和繁殖，这种方式称为转染（transfection）。M13噬菌体DNA导入大肠杆1菌就常用转染的方法。重组DNA进入宿主细胞也常用转染方式。***经典的是1973年建立的磷酸钙法，其利用的基本现象是：DNA如以磷酸钙-DNA共沉淀物形式出现时，培养细胞摄取DNA的效率会显著提高。用电穿孔法处理培养的哺乳类细胞也能提高细胞摄取DNA能力，但所用外加电场的强度、电脉冲的长度等条件与处理***者都很不相同。用人工脂质膜包裹DNA，腺病毒载体，形成的脂质体可以通过与细胞膜融合而将DNA导入细胞，方法简单而有效，但缺点是有细胞毒性和血1清的不亲和性，近年来人们发现了一种更为有效的转染***－阳离子聚合物，其克服了脂质体转染***细胞毒性大，在体内易被血1清清除等缺点，具有转染效率1高，操作简单而日益受到重视。位点特异性重组法这类方法使用来源于噬菌体的重组酶，这类重组酶能够识别特异性序列位点(长度数十碱基对至数百碱基对)并引发含有该位点的序列之间的重组；在腺病毒骨架和穿梭质粒中添加重组酶能够识别的特异性位点，在细胞内表达对应的噬菌体重组酶或体外使用重组酶，介导骨架质粒和穿梭质粒之间的位点特异性重组，将目的***引入骨架质粒，形成带有重组腺病毒***组的腺病毒质粒；转染包装细胞，进行病毒载体拯救。该方法进一步简化了腺病毒质粒的制备过程，它的缺限是在腺病毒***组的某些部位不可避免的残留了重组酶特异性识别位点。腺病毒是无包膜的线性双链DNA病毒，在自然界分布广泛，至少存在100种以上的血1清型。其***组长约36kb，两端各有一个反向末端重复区（ITR），ITR内侧为病毒包装信号。***组上分布着4个早期转录元（E1、E2、E3、E4）承担调节功能，以及一个晚期转录元负责结构蛋白的编码。早期***E2产物是晚期***表达的反式因子和copy必须因子，早期***E1A、E1B产物还为E2等早期***表达所必须。因此，E1区的缺失可造成病毒在copy阶段的流1产。E3为copy非必须区，其缺失则可以大大地扩大插入容量。腺病毒载体大多以5型（Ad5）、2型（Ad2）为基础，新增了55型（Ad55），很多研究机构在研究当中，55型将比5型流行以及应用更具广泛性。友名生物公司-腺病毒载体由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是湖北武汉,其它的见证者，多年来，公司贯彻执行科学管理、创新发展、诚实守信的方针，满足客户需求。在友名生物***携全体员工热情欢迎各界人士垂询洽谈，共创友名生物更加美好的未来。)