加A尾***盒-友名生物(推荐商家)
长***组序列、特别是包含大的***簇的那些的克1隆对于产生medicine和生物燃料的合成生物学和***工程工作特别重要。传统的基于PCR的克1隆方法通常受限于DNA模板的长度和GC含量:标准的PCR反应常规产生至多10kb的片段,而更长的PCR产物需要反应条件的繁琐优化,并且甚至在理想条件下,通常受限于35kb5。或者,可通过装配多个短片段,加A尾***盒,例如重叠PCR产物或化学合成的DNA寡聚物,产生长的目的***组序列,但这样的方法趋于耗时和昂贵,特别是对于获得长于50kb的序列(其通常需要3-5阶段,每个包含多个装配事件)6,7。获得长的***组序列的另一方法是通过***组DNA的限制性酶消化。T4RNA连接酶用途:用RNA3末端标记;RNA和RNA分子间连接;寡核苷酸的环化;tRNA修饰;5RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链;在蛋白质特***点引入非天然氨基酸。来源:由大肠杆1菌表达,表达***的来源为T4嗜菌体。活性定义:37℃30分钟内,催化1nmol5-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。活性检测条件:50mMTris-HCl(pH7.5),10mMMgCl2,10mMDTT,1mMATP,10μM5-[P]-(A)12-18(10μMin5-termini)。纯度:不含DNA内切酶和外切酶,不含RNA酶,不含磷1酸酯酶。酶储存溶液:10mMTris-HCl(pH7.5),1mMDTT,50mMKCl,0.1mMEDTA,50%(v/v)glycerol。ReactionBuffer(10X):500mMHEPES-NaOH(pH8.0at25℃),100mMMgCl2,100mMDTT。***的分子***是相当复杂的过程,其中***重要的是连接酶互补碱基之间的配对,形成双链。并在DNA连接酶的作用下,使同一DNA分子的两端连接成环状,或使两个分子连成一大的线状分子。不同限制性内切酶切割DNA产生的三种不同类型的末端。***的分子***是相当复杂的过程,除了需要限制性内切酶外,还需要其他--些工具酶包括连接酶、DNA聚合酶、RNA聚合酶、核酸酶、末端修饰酶等,对DNA或RNA进行各种各样的修饰。其中***重要的是连接酶。加A尾***盒-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)