凝胶阻滞迁移电泳检测服务（EMSA）凝胶迁移或电泳迁移率实验（electrophoreticmobilityshiftassay，EMSA）是一种研究DNA/RNA结合蛋白和其相关的DNA/RNA结合序列相互作用的技术，可用于定性和定量分析。依据实验需要，设计标记探针、非标记探针、蛋白特异性抗ti等参照物，基于DNA-蛋白质或RNA-蛋白质复合体在聚bing烯酰胺凝胶电泳（PAGE）中有不同迁移率的原理，当转录因子与特异的DNA或RNA结合后，其在PAGE中的迁移率将小于未结合核蛋白转录因子的DNA，从而检测到活化的与DNA或RNA结合的蛋白转录或调节因子。动物***细胞***组DNA提取操作步骤1.取新鲜或冰冻动物***块0.1g（0.5cm3），尽量剪碎。置于玻璃匀浆器中，加入1ml的细胞裂解缓冲液匀浆至不见***块，转入1.5ml离心管中，加入蛋白酶K（500ug/ml）20μl，pcr，混匀。在65℃恒温水浴锅中水浴30min，也可转入37℃水浴12～24h，间歇振荡离心管数次。于台式离心机以12000rpm离心5min，取上清液入另一离心管中。2.加2倍体积异，倒转混匀后，可以看见丝状物，用100ul吸头挑出，凉干，用200ulTE重新溶解。（可进行PCR反应等，需要进一步纯化的按下列步骤进行）3.加等量的酚??振荡混匀，离心12000rpm，5min。4.取上层溶液至另一管，加入等体积的?，PCR实验室，振荡混匀，离心12000rpm，5min。5.取上层溶液至另一管，加入1/2体积的7.5mol/L氨加入2倍体积的无水乙醇，混匀后室温沉淀2min，离心12000rpm，10min。6.小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁的残余液滴除掉。7.用1ml70%乙醇洗涤沉淀物1次，离心12000rpm，5min。8.小心倒掉上清液，将离心管倒置于吸水纸上，将附于管壁的残余液滴除掉，室温干燥。9.加200ulTE重新溶解沉淀物，然后置于4℃或?C20℃保存备用。10.吸取适量样品于GeneQuant上检测浓度和纯度。蛋白质的分离纯化在生***学研究应用中使用广泛，是一项重要的操作技术。一个典型的真核细胞可以包含数以千计的不同蛋白质，一些含量十分丰富，一些仅含有几个拷贝。为了研究某一个蛋白质，必须首先将该蛋白质从其他蛋白质和非蛋白质分子中纯化出来。一、主要方法1.蛋白质的选择吸附分离（利用颗粒不同程度的颗粒吸附力来使分离的目的达到）。2.按照配体特性的分离-亲和层析（利用蛋白质分子与另一种称为配体的分子能够特异结合这一生物性质）。3.低温沉淀法，荧光定量pcr，使用如，乙醇等与水可混溶的，降低多数蛋白质的溶解度并且将其析出，和盐析相比较，这种方法的分辨率更加的高，然而蛋白质比较容易变形，需要在低温下进行。4.按照分子大小不一样的方法，密度梯度离心（在介质中对蛋白质离心时，蛋白质沉降速度取决于它的质量和密度，质量和密度越大，那么沉降越快；凝胶过滤（一种柱层析）；超过滤（利用蛋白质分子不能从半透膜通过的性质）。5.按照溶解度差异分离，等电点沉淀法盐溶与盐析（使用一定浓度盐溶液来使蛋白质的溶解度增大或减小）；（因为在等电点时蛋白质分子的净电荷为0，使分子间静电斥力减少了，所以，聚集沉淀比较容易，这时具有小的溶解度）。6.按照电荷不同的分离方法。主要分为离子交换层析和电泳分离。PCR实验室-pcr-英瀚斯生物科技由南京英瀚斯生物科技有限公司提供。南京英瀚斯生物科技有限公司实力不俗，信誉可靠，在江苏南京的技术合作等行业积累了大批忠诚的客户。英瀚斯带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌，共创美好未来！)