DNA提取***-友名生物技术(图)
植物DNA的SDS提取法:1取2-3g新鲜叶片,在液氮中研磨成粉状(防止溶化)后转入15ml离心管中。2加入5ml于65℃预热的提取缓冲液,65℃水浴保温30min(摇动数次),使提取液与样品充分混合。3加入2ml5mol/LKAc,剧烈振荡,冰浴保温20min以上。42700×g离心20min,将上清液倒入新的15ml离心管中,(若提取DNA用于Southern等实验,一般在转移上清时加滤膜,防止样品残渣混入,DNA提取***,可保证DNA纯度)。5加入4ml氯1仿/异戊1醇(24∶1),摇匀,平衡,2700×g离心15min。6在另一新的15ml离心管中加入5ml预冷的异丙1醇,将上清液用移液转入此管,在-20℃冷却30min以上。72700×g离心10min,弃去上清液,用4ml70%乙醇洗涤,室温保持10min。2700×g离心3min,倒去上清液。8重复步骤7,用4ml70%乙醇洗涤,室温保持10min。2700×g离心3min,倒去上清液。超净工作台内吹干(3h左右)。9加1mlTE缓冲液中溶解,加10μlRNase(10mg/ml),在37℃恒温箱中温育20min。10再加100μl3mol/LNaAc和2ml无水乙醇,2700×g离心3min,倒去上清液。超净工作台内吹干(3h左右)。11将DNA沉淀溶于150μlTE中,置于超净工作台内(3h左右)。将TE溶液转入已灭菌的15mleppendorf管中,-20℃保存备用。人ELISA***盒的原理及优势:1、ELISA是以immune学反应为基础,将抗原、antibody的特异性反应与酶对底物的有效催化作用相结合起来的一种敏***很高的试验技术。2、由于抗原、antibody的反应在一种固相载体──聚苯乙1烯微量滴定板的孔中进行,每加入一种***孵育后,可通过洗涤除去多余的游离反应物,从而保证试验结果的特异性与稳定性。3、Elisa生物试验是一种敏***高,特异性强,重复性好的实验诊断方法。由于其***稳定、易保存,操作简便,结果判断较客观等因素,已广泛应用在immune学检验的各领域中。4、ELISA检测***盒适用于体外定性检测人血1清或血浆中的抗人类HEV病毒MantibodyELISA检测。5、ELISA的基础是抗原或antibody的固相化及抗原或antibody的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或antibody仍保持其immune学活性,酶标记的抗原或antibody既保留其immune学活性,又保留酶的活性。选择素elisa***盒的实验原理选择素elisa***盒是一类异亲型结合、Ca2+依赖的细胞粘着分子,能与特异糖基识别并结合。主要参与白细胞与血管内皮细胞之间的识别与粘着。实验原理:将目标包被于96孔微孔板中,制成固相载体,向微孔中分别加入品或标本,其中的目标连接于固相载体上的结合,然后加入微生***的目标,将未结合的生物素洗净后,加入HRP标记和亲和素,再次洗涤后加入TMB底物显色。TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色,并在酸的作用下转化成终的。颜色的深浅和样品中的目标呈正相关。用酶1标仪在450nm波长下测定吸光度(O.D.值),计算样品浓度。精密度:精密度用样品测定值的变异系数CV表示。CV(%)=SD/mean×100批内差:取同批次选择素elisa***盒对低、中、高值定值样本进行定量检测,每份样本连续测定20次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。批间差:选取3个不同批次的***盒分别对低、中、高值定值样本定量测定,每个样本使用同一***盒重复测定8次,分别计算不同浓度样本的平均值及SD值。批内差:CV<10%Inter-批间差:CV<13%经测定,***盒在X期内按推荐温度保存,其活性率小于5%。为减小外部因素对***盒前后检测值的影响,实验室的条件需尽量保持一致,尤其是实验室内温度、湿度及温育条件。其次由同一实验员来进行操作可人为误差。选择素elisa***盒识别的配体都是一些寡糖基团,迄今为止发现的配体都是一些具有唾液酸化路易斯寡糖(s-Le,siaglyl-Lewis)或类似结构的分子。一种寡糖基团可以存在多种糖蛋白和糖脂分子上,并分布于多种细胞表面,因此选择素分子配体在体内分布较为广泛。DNA提取***-友名生物技术(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司坚持“以人为本”的企业理念,拥有一支高素质的员工***,力求提供更好的产品和服务回馈社会,并欢迎广大新老客户光临惠顾,真诚合作、共创美好未来。友名生物——您可信赖的朋友,公司地址:湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701,联系人:董先生。)