腺病毒载体-武汉友名生物
腺病毒的结构腺病毒含13%DNA和87%的蛋白质,病毒体分子量约为175×106。病毒***组为线状双链DNA,大约含35kb~36kb,腺病毒12、18和31型的DNA组成中,G+Cmol%***低(48%~49%),腺病毒载体,属于对动物具有高致***性***型。腺病毒1、2、4、5、8等型的G+Cmol%较高(61%),致***性反而低或无。这是一种用于人腺病毒分离株的分组的标准,根据其***同源性将人腺病毒分为A~F等6组。真核细胞同源重组法1994年,GrahamF建立了在293细胞同源重组产生重组腺病毒的方法。这个方法需要2个质粒:骨架质粒含有腺病毒绝大部分***组序列,但不含有包装信号;穿梭质粒含有ITR、包装信号和目的***克1隆位点,以及两段与骨架质粒有重叠的序列。将目的***克1隆到穿梭质粒,与骨架质粒共转染293细胞,由于这两个质粒的部分序列有重叠,能够在细胞内发生同源重组,***终产生完整的载体***组,并包装出重组病毒颗粒。该方法曾经被广泛使用,推动了腺病毒载体的发展。由于细胞内重组效率低,某些重组事件还可能产生可copy病毒(RCV),必需经过噬斑纯化才能获得正确的克1隆化的重组病毒,费时费力,正逐渐被其他方法替代。PEG法其基本原理是在二价阳离子(Mg2+、Ca2+等)存在的情况下,PEG能够有效地诱导DNA产生颗粒状沉淀,从而使细胞膜能够通过内吞噬作用吸收这种DNA颗粒。1993年Golovkin等用PEG法将H89的原生质体与含有鼠二氢叶酸还原酶(DHFR)突变***(氨甲1喋呤抗性)的质粒共培养,此***插入了玉米Ds1转座子中。筛选得到的愈伤***,在不含激1素的培养基上再生长出植株。同年Omirulleh等用PEG法将外源***导入到了HE89的原生质体中,建立了植株再生的转化体系。PEG法虽然转化效率较高,但必须以裸1露的原生质体为受体,而且还受到***型的限制。腺病毒载体-武汉友名生物由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司实力不俗,信誉可靠,在湖北武汉的其它等行业积累了大批忠诚的客户。友名生物带着精益求精的工作态度和不断的完善创新理念和您携手步入辉煌,共创美好未来!)