DNAcopy的引发所有DNA的copy都是从固定起始点开始的，而目前已知的DNA聚合酶都只能延长已存在的DNA链，而不能从头合成DNA链，那么一个新DNA的copy是怎样开始的呢？研究发现，DNAcopy时，往往先由引发酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶从RNA引物3端开始合成新的DNA链。对于前导链来说，这一引发过程比较简单，只要有一段RNA引物，DNA聚合酶就能以此为起点一直合成下去。但对于滞后链来说，引发过程就十分复杂，需要多种蛋白质和酶的协同作用，AMV反转录酶，还牵涉冈崎片段的形成和连接。以RibocloneM-MLVCDNA合成技术为例。RibocloneM—MLVcDNA合成系统采用M—MLV反转录酶的RNaseH缺失突变株取代AMV反转录酶，使合成的cDNA更长。该系统的链合成使用M-MLV反转录酶，cDNA第二链合成采用置换合成法，采用RNaseH和DNA聚合酶I进行置换合成，用T4DNA聚合酶切去单链末端，方法简便易行。T4RNA连接酶用途：用RNA3末端标记；RNA和RNA分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA修饰；5RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链；在蛋白质特***点引入非天然氨基酸。来源：由大肠杆1菌表达，表达***的来源为T4嗜菌体。活性定义：37℃30分钟内，催化1nmol5-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。活性检测条件：50mMTris-HCl(pH7.5)，10mMMgCl2，10mMDTT，1mMATP，10μM5-[P]-(A)12-18(10μMin5-termini)。纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷1酸酯酶。酶储存溶液：10mMTris-HCl(pH7.5)，1mMDTT，50mMKCl，0.1mMEDTA，50%(v/v)glycerol。ReactionBuffer(10X)：500mMHEPES-NaOH(pH8.0at25℃)，100mMMgCl2，100mMDTT。AMV反转录酶-武汉友名生物公司(图)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司是一家从事“商务服务”的公司。自成立以来，我们坚持以“诚信为本，稳健经营”的方针，勇于参与市场的良性竞争，使“友名生物”品牌拥有良好口碑。我们坚持“服务至上，用户至上”的原则，使友名生物在其它中赢得了客户的信任，树立了良好的企业形象。特别说明：本信息的图片和资料仅供参考，欢迎联系我们索取准确的资料，谢谢！)