WB化学发光底物-友名生物技术
蛋白表达系统蛋白表达系统是指由宿主、外源***、载体和辅助成分组成的体系。通过这个体系可以实现外源***在宿主中表达的目的。一般由以下几个部分组成:1、宿主。表达蛋白的生物体。可以为***、酵母、植物细胞、动物细胞等。由于各种生物的特性不同,适合表达蛋白的种类也不相同。2、载体。载体的种类与宿主相匹配。根据宿主不同,WB化学发光底物,分为原核(***)表达载体、酵母表达载体、植物表达载体、哺乳动物表达载体、昆虫表达载体等。载体中含有外源***片段。通过载体介导,外源***可以在宿主中表达。3、辅助成分。有的表达系统中还包括了协助载体进入宿主的辅助成分。比如昆虫-杆状病毒表达体系中的杆状病毒。微量凯氏(kjeldahl)定氮法样品与浓1***共热。含氮有机物即分解产生氨(消化),氨又与***作用,变成***氨。经强碱碱化使之分解放出氨,借蒸汽将氨蒸至酸液中,根据此酸液被中和的程度可计算得样品之氮含量。若以甘氨酸为例,其反应式如下:NH2CH2COOH+3H2SO4――2CO2+3SO2+4H2O+NH3(1)2NH3+H2SO4――(NH4)2SO4(2)(NH4)2SO4+2NaOH――2H2O+Na2SO4+2NH3(3)反应(1)、(2)在凯氏瓶内完成,反应(3)在凯氏蒸馏装置中进行。为了加速消化,可以加入CuSO4作催化剂,K2SO4以提高溶液的沸点。收集氨可用硼酸溶液,滴定则用强酸。实验和计算方法这里从略。计算所得结果为样品总氮量,如欲求得样品中蛋白含量,应将总氮量减去非蛋白氮即得。如欲进一步求得样品中蛋白质的含量,即用样品中蛋白氮乘以6.25即得。无细胞系统是利用细胞提取物(而不是细胞)进行***转录和翻译的系统。一个无细胞***表达系统主要包括三个部分:细胞提取物,反应混合液,以及核酸模板1.细胞提取物:从细胞中提取的物质,主要包含核糖体、RNA聚合酶、其他转录和翻译蛋白(比如σ因子、起始因子和延伸因子),以及用于能量代谢的酶和辅因子。在有些菌株的提取物中,可能***了蛋白酶和核酸酶的活性。2.反应混合液:包含蛋白质合成所需的一些原料,如氨基酸、核苷酸、盐离子(如铵盐、镁、钾)、能源(糖类、磷酸肌酸等)、拥挤***(crowdingagents)、代谢辅因子(辅酶A、NAD)、缓冲液、tRNA以及其他代谢添加剂等。3.核酸模板:可以是质粒DNA或PCR产物线装DNA,浓度通常在1-20nM。无细胞系统一般的反应体积为10微升,但是根据其实际应用,反应体系可以从10^(-15)到10^3变化。在开始反应时,将三种组分在16-37℃下孵育,蛋白质合成将在1-24h内进行。WB化学发光底物-友名生物技术由武汉友名生物技术有限公司提供。WB化学发光底物-友名生物技术是武汉友名生物技术有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:董先生。)
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