友名生物公司-核酸共沉剂
RNA抽取一般使用Trizol法抽提:Trizol是一种总RNA抽提***,内含异硫qing酸胍等物质,能迅速裂解细胞,***细胞释放出的核酸酶活性。目前常用Trizol法进行提取***或细胞中的RNA。Trizol作用原理:在匀质化或溶解样品中,Trizol***可保持RNA的完整性,同时能***细胞及溶解细胞成分。加入氯1仿离心后,裂解液分层成水相和有机相。RNA存在于水相中。水相转移后,RNA通过异丙1醇沉淀回收。移去水相后,用乙醇可从中间相沉淀得到DNA,加入异丙1醇沉淀可从有机相得到蛋白质。植物DNA的“一管法”提取方法:1称取100mg新鲜植物***,剪碎置于15ml离心管中,可加入少许无菌石英砂,加入3滴提取缓冲液,用带玻璃钻头的电钻充分研磨匀浆。2加入400μl提取缓冲液,混匀后置于90℃水浴中,不时颠倒摇匀。3温育20min后,置于冰浴中5min,使***和聚乙烯聚吡咯烷酮(polyvinylpolypyrrolidone,PVPP)沉淀,置于4℃下保存备用。DNA提取过程中各种***的作用及原理溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,核酸共沉剂,加抽提液时,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而***细胞膜。(2)解聚细胞中的核蛋白。(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能***核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。友名生物公司-核酸共沉剂由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司在其它这一领域倾注了诸多的热忱和热情,友名生物一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创辉煌。相关业务欢迎垂询,联系人:董先生。)