T4RNA连接酶用途：用RNA3末端标记；RNA和RNA分子间连接；寡核苷酸的环化；tRNA修饰；5RACE中寡核苷酸连接到cDNA单链；在蛋白质特***点引入非天然氨基酸。来源：由大肠杆1菌表达，表达***的来源为T4嗜菌体。活性定义：37℃30分钟内，催化1nmol5-[P]-(A)12-18成为磷酸酶不能消化的环形产物所需的酶量定义为1个活性单位。活性检测条件：50mMTris-HCl(pH7.5)，10mMMgCl2，10mMDTT，1mMATP，10μM5-[P]-(A)12-18(10μMin5-termini)。纯度：不含DNA内切酶和外切酶，不含RNA酶，不含磷1酸酯酶。酶储存溶液：10mMTris-HCl(pH7.5)，1mMDTT，50mMKCl，0.1mMEDTA，50%(v/v)glycerol。ReactionBuffer(10X)：500mMHEPES-NaOH(pH8.0at25℃)，100mMMgCl2，100mMDTT。自身引导法。合成的单链eDNA3’端能够形成一短的发夹结构，这就为第二链的合成提供了现成的引物。当链合成反应产物的DNA—RNA杂交链变性后利用大肠DNA聚合酶IKlenow片段或反转录酶合成eDNA第二链，用对单链特异性的S1核酸酶消化该环，即可进一步。但自身引导合成法较难控制反应，而且用S1核酸酶切割发夹结构时无一例外地将导致对应于mRNA5’端序列出现缺失和重排，因而该方法很少使用。DNAcopy的引发所有DNA的copy都是从固定起始点开始的，而目前已知的DNA聚合酶都只能延长已存在的DNA链，反转录引物，而不能从头合成DNA链，那么一个新DNA的copy是怎样开始的呢？研究发现，DNAcopy时，往往先由引发酶在DNA模板上合成一段RNA引物，再由DNA聚合酶从RNA引物3端开始合成新的DNA链。对于前导链来说，这一引发过程比较简单，只要有一段RNA引物，DNA聚合酶就能以此为起点一直合成下去。但对于滞后链来说，引发过程就十分复杂，需要多种蛋白质和酶的协同作用，还牵涉冈崎片段的形成和连接。反转录引物-友名生物(在线咨询)由武汉友名生物技术有限公司提供。行路致远，砥砺前行。武汉友名生物技术有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴，更矢志成为其它具有竞争力的企业，与您一起飞跃，共同成功!)