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细胞冻存复苏方法1.细胞实验室进行常规消毒,紫外照射40min以上。2.培养液(DMEM)、0.25%胰蛋白酶(Trypsin)恒温水浴箱37°C预热20min,备用。3.二亚砜(DMSO)在40°C冰箱中冷藏30min,备用。4.从液氮保存罐中取出冻存管,立即放入400°C水浴中,快速摇晃,CS50冻存袋供应商,直至冻存液完全融化。5.将细胞悬液移入15ml离心管,缓慢加入4ml培养液,离心(1000r/min,5min)。6.用培养液悬液混悬沉淀细胞,调整细胞浓度,方培养箱中培养。7.记录复苏日期。冻存袋,可千万别这么用哈!1.不要使用金属管夹2.不要离心3.不要在冻存袋上直接写字标识冻存细胞的信息4.不要在冻存袋表面粘帖标签不推荐使用同一冻存袋多次冻融细胞5.DMSO稀释以后才能放进冻存袋,DMSO浓度不要超过10%6.复苏细胞时建议把冻存袋放在一个保护袋中进行融化7.不要超过冻存袋推荐的工作体积冻存袋注意事项1.欲冷冻保存之细胞应在生长良好且存活率高之状态,约为80~90%致密度。冷冻前检测细胞是否仍保有其特有性质,例如hybridoma应在冷冻保存前一至二日测试是否有antibody之产生。2.细胞在液氮中可长期冻存没有时间限制,而不会影响细胞活力﹔在-70度可保存数月。注意冷冻保护剂之品质。DMSO应为***级等级,无菌且无色是直接购买无菌产品,以5~10m1小体积分装,CS50冻存袋代理,4℃避光保存,勿作多次解冻。3.冻存细胞数量要足够。无论再怎么小心,细胞在冷冻和复苏过程中总会死掉一批的。所以,CS50冻存袋,一开始冻存细胞的数量要足够。一般要达到5×10^6/毫升,一瓶不够两瓶凑。但是,这个不能一概而论。有些细胞,比如杂交瘤细胞,只需要1-3x10^6/毫升CS50冻存袋供应商-北京思齐生物技术公司-CS50冻存袋由北京思齐生物技术有限公司提供。北京思齐生物技术有限公司位于北京市朝阳区裕民路12号元辰鑫大厦E1-714。在市场经济的浪潮中拼博和发展,目前思齐生物在其它中享有良好的声誉。思齐生物取得全网商盟认证,标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。思齐生物全体员工愿与各界有识之士共同发展,共创美好未来。)
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