RNA提取***-友名生物(推荐商家)
从动物***中提取***组DNA使用研钵进行匀浆时:①取1~100mg的动物***或人***移入冰浴预冷的研钵中,快速用力展研成匀浆。注)下列***请加液氮研磨至粉末状。A.富含DNA酶的胰脏、脾1脏、胸腺、淋巴等***。B.富含胶原蛋白的皮肤、肌腱等***。C.富含角质蛋白的***或坚硬的***(如骨骼)等。②加入650μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1,温和研磨30秒钟。注)使用上述①-注)的实验材料时,请在加入SolutionA及RNaseA1后,将研钵置于65℃水浴上研磨1分钟。③收集650μl研磨好的***匀浆液移至CollectionTube中。如果匀浆体积不足650μl,请补充SolutionA至650μl,65℃保温5分钟。使用研磨棒进行匀浆时:①取1~100mg的动物***或人***移入冰浴预冷的CollectionTube中,用研磨棒快速研磨成糊状。②加入350μl的SolutionA和0.9μl的RNaseA1后用研磨棒快速研磨成匀浆。③加入350μl的SolutionA将研磨棒上的匀浆冲入CollectionTube中,充分振荡混合后,65℃保温5分钟。DNA提取过程中各种***的作用及原理溶液II-NaOH-SDS液:NaOH:核酸在pH大于5,小于9的溶液中,是稳定的。但当pH>12或pH<3时,就会引起双链之间氢键的解离而变性。在溶液II中的NaOH浓度为0.2mo1/L,加抽提液时,RNA提取***,该系统的pH就高达12.6,因而促使染色体DNA与质粒DNA的变性。SDS:SDS是离子型表面活性剂。它主要功能有:(1)溶解细胞膜上的脂质与蛋白,因而溶解膜蛋白而***细胞膜。(2)解聚细胞中的核蛋白。(3)SDS能与蛋白质结合成为R-O-SO3-…R+-蛋白质的复合物,使蛋白质变性而沉淀下来。但是SDS能***核糖核酸酶的作用,所以在以后的提取过程中,必须把它去除干净,防止在下一步操作中(用RNase去除RNA时)受到干扰。核糖核酸(缩写为RNA,即RibonucleicAcid),存在于生物细胞以及部分病毒、类病毒中的遗传信息载体。RNA由核糖核苷酸经磷酸二酯键缩合而成长链状分子。一个核糖核苷酸分子由磷酸,核糖和碱基构成。RNA的碱基主要有4种,即A(腺piao呤)、G(鸟piao呤)、C(胞***H4N2)、U(尿***H4N2),其中,U(尿***H4N2)取代了DNA中的T。核糖核酸在体内的作用主要是引导蛋白质的合成。***一个细胞含RNA约10pg(含DNA约7pg)。与DNA相比,RNA种类繁多,分子量较小,含量变化大。RNA可根据结构和功能的不同分为信使RNA和非编码RNA。非编码RNA分为非编码大RNA和非编码小RNA。非编码大RNA包括核糖体RNA、长链非编码RNA。非编码小RNA包括转移RNA、核酶、小分子RNA等。小分子RNA(20~300nt)包括miRNA、SiRNA、piRNA、scRNA、snRNA、snoRNA等,***也有小分子RNA(50~500nt)。RNA提取***-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司在其它这一领域倾注了诸多的热忱和热情,友名生物一直以客户为中心、为客户创造价值的理念、以品质、服务来赢得市场,衷心希望能与社会各界合作,共创成功,共创辉煌。相关业务欢迎垂询,联系人:董先生。)
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