DNA提取过程中各种***的作用及原理溶液III--3mol/LNaAc(pH4.8)溶液：NaAc的水溶液呈碱性，为了调节pH至4.8，必须加入大量的冰醋酸。所以该溶液实际上是NaAc-HAc的缓冲液。用pH4.8的NaAc溶液是为了把pH12.6的抽提液，调回pH至中性，使变性的质粒DNA能够复性，并能稳定存在。而高盐的3mol/LNaAc有利于变性的大分子染色体DNA、RNA以及SDS-蛋白复合物凝聚而沉淀之。前者是因为中和核酸上的电荷，减少相斥力而互相聚合.如何确认RNA的质量实时荧光定量PCR技术是通过测定RNA的转录水平来评估***的活力。RNA样本提取的质量直接影响***表达分析。影响RNA品质的因素有以下三种：RNA浓度、RNA纯度和RNA完整性。检测RNA浓度、纯度和完整性的方式主要有以下几种：紫外分光光度计法：测量260nm吸收值计算RNA浓度，测量260nm/280nm吸收值的比值，用于评估RNA纯度。需要注意的是：在检测核酸物质时应该在固定的PH溶液中进行。260nm/280nm的比值范围在1.9~2.1之间。＜1.9，说明有蛋白质残留；＞2.1，说明RNA可能发生降解。琼脂糖凝胶电泳：完整的RNA通常有三条带，***亮的是28S条带，其次是18S条带，***淡的是5S条带（部分***盒提取时会过滤掉5S条带）。通过琼脂糖凝胶电泳可以检测28S和18S的比值。该方法主要用于检测RNA的纯度和完整性。如果28S和18S条带明亮、清晰、条带锐利，28S的亮度在18S条带的两倍以上，我们认为RNA的质量***好。若RNA条带出现弥散，宏***组建库***盒，原因可能：RNA被核酸酶降解、电压或电流过大、上样量过高或过低等。PCR产物的回收（胶回收***盒）1.胶回收的目的（1）去除非特异性扩增的产物（2）去除多余的底物（3）去除多余的Taq酶（4）得到目的片段2.胶回收的过程（1）切胶：紫外下切胶，称重。之后用头将胶块捣碎。切胶的刀片建议选用一次性刀片，实验台等也尽可能用乙醇擦拭干净。可通过空EP管与装胶EP管质量的差值计算胶的质量。注意切胶时尽可能避免切到条带外的凝胶，且避免紫外时间过长。别忘记胶条有厚度，前后多余的部分也尽量切除。（2）溶胶：每1mg胶加入1μL膜结合液（MB），按比例1:1加入MB，55℃水浴溶解。每1~2min震荡混匀，待溶解后至少在水浴中保持1~2min，保证胶块完全溶解。在电泳过程中，DNA会与大分子的多糖紧密结合，凝胶的种类和质量不同，DNA与之结合力也不同，只有凝胶充分溶解DNA才能充分释放。否则，凝胶将与DNA一起沉淀下来，洗脱后将影响回收结果的纯度。（3）结合：将溶胶转移至纯化柱内，12000rpm离心1min，倒掉收集管中的废液，将纯化柱重新插回收集管中。胶块完全溶解后建议将胶液温度降至室温再上柱，因为纯化柱在温度较高时结合DNA的能力较弱。武汉友名生物-宏***组建库***盒由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司拥有很好的服务与产品，不断地受到新老用户及业内人士的肯定和信任。我们公司是商盟认证会员，点击页面的商盟***图标，可以直接与我们***人员对话，愿我们今后的合作愉快！)