限制性内切酶的质量控制鉴定限制性内切酶的一个活性单位是指，在50μl的反应体系里，采用随酶提供的NEBuffer，用1个小时的时间，消化1μg底物DNA所需要的酶量。酶切反应应在带盖的eppendorf管中进行，选用技术数据卡上所标明的适宜温度。在确定酶活性之前，浓缩的酶应该用推荐的贮存液稀释成大约1，000单位/ml。质量控制所有质量控制鉴定结果都公布在随酶提供的技术数据卡上。限制性内切酶对环状质粒DNA产生的酶切片段数与切口数一致。因此，鉴定酶切后的片段在电泳凝胶的区带数，就可以推断切口的数目;从片段迁移率可判断酶切片段大小。用已知分子量的线状DNA为对照，通过电泳迁移率的比较，可以粗略地测出分子形状相同的未知DNA的相对分子大小。质粒DNA的相对分子量(Mr)一般在106～107范围内，如质粒pBR的相对分子质量为2.8×106，在细胞内有三种构型：①共价闭环DNA，常以超螺旋形式存在;②如果两条链中有一条链发生一处或多处断裂，分子就能旋转而消除链的张力，这种松弛型的分子叫作开环DNA;③双链线状DNA由于两条链的切口在同一部位被切断，不能成环，完全开放成线状，内切酶，简称线性DNA。如果要测定质粒DNA的相对分子量，建议把质粒用单一切口的酶水解得到线性DNA部分片段。三种构型的质粒DNA在电泳时的泳动速度为：共价闭环DNA>线状DNA>开环DNA。核酸酶污染的过夜鉴定所有的限制性内切酶与1μg底物DNA在50μl反应体系中，采用推荐的NEBuffer温育过夜。比较酶切1小时的特征带型和过夜酶切的带型。如果两种情况下带型均明显、没有改变，则说明测试的酶中不存在非特异性的dna酶。可以温育过夜的***大酶单位数。核酸外切酶污染鉴定所有的限制性内切酶与1μg单双链混合的、3H标记的E.coliDNA在50μl反应体系中，采用随酶提供的NEBuffer，在推荐的温度下温育4小时。通过可溶解的TCA着色，可以计算出反应体系中被标记的DAN的百分比，进而可以显示出核酸外切酶的污染。该种方法可检测出的底线是0.05%。内切酶-武汉友名生物由武汉友名生物技术有限公司提供。“商务服务”选择武汉友名生物技术有限公司，公司位于：湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701，多年来，友名生物坚持为客户提供好的服务，联系人：董先生。欢迎广大新老客户来电，来函，亲临指导，洽谈业务。友名生物期待成为您的长期合作伙伴！)