蛋白质含量测定操作方法1.标准曲线的测定：取12支试管分两组，分别加入0，0.2，0.4，0.6，0.8，1.0毫升的标准蛋白质溶液，用水补足到1毫升，然后加入4毫升双缩脲***。充分摇匀后，在室温（20～25℃）下放置30分钟，于540nm处进行比色测定。用未加蛋白质溶液的首支试管作为空白对照液。取两组测定的平均值，以蛋白质的含量为横座标，光吸收值为纵座标绘制标准曲线。2、样品的测定：取2～3个试管，用上述同样的方法，测定未知样品的蛋白质浓度。注意样品浓度不要超过10mg/ml。folin―酚***法早先是由lowry确定了蛋白质浓度测定的基本步骤。以后在生***学领域得到广泛的应用。这个测定法的优点是灵敏度高，Ｈｉｓ标签切除酶，比双缩脲法灵敏得多，缺点是费时间较长，要准确控制操作时间，标准曲线也不是严格的直线形式，且专一性较差，干扰物质较多。对双缩脲反应发生干扰的离子，同样容易干扰lowry反应。而且对后者的影响还要大得多。酚类、柠檬酸、***铵、tris缓冲液、甘氨酸、糖类、甘油等均有干扰作用。浓度较低的尿素（0.5%），***纳（1%），NaNO浓度（1%），TCA（0.5%），乙醇（5%），***H10O（5%），CH3COCH3（0.5%）等溶液对显色无影响，但这些物质浓度高时，必须作校正曲线。含***铵的溶液，只须加浓碳酸钠―NaOH溶液，即可显色测定。若样品酸度较高，显色后会色浅，则必须提高碳酸钠―NaOH溶液的浓度1～2倍。工业应用领域①皮革脱毛：酶脱毛（50-55℃，PH7.0-8.0，20—25u/ml）→水洗→浸酸→鞣制。②胶片回收银：50℃，PH9.5-10.5，用20—23u/ml进行回收。③丝绸脱胶：预处理→脱水→酸处理（蛋白酶18—24u/ml，肥皂0.75%，48—50℃，30—60分钟，PH7—8）→脱水→扯皮→冲洗→脱水→抖松→烘干→抖松。④饲料加工的应用：该酶与α—淀粉酶、酸性蛋白酶、纤维素酶、糖化酶等复合使用。可广泛应用于仔猪、育成猪、禽类、鱼类的饲喂，可将酶制剂加入饲料后，人为的控制温度、湿度、PH和作用时间，使物料在酶的作用下得到一定程度的降解。小规模饲养时可将酶制剂直接添加到饲料中，经充分拌和后饲喂畜禽，拌和时应采用逐步扩大的拌和方法，以保证酶在饲料中的均匀分布。通常用量为饲料的0.1—1.0%。Ｈｉｓ标签切除酶-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。武汉友名生物技术有限公司为客户提供“商务服务”等业务，公司拥有“友名生物”等品牌，专注于其它等行业。，在湖北武汉市洪山区野芷湖西路16号创意天地办公04栋701的名声不错。欢迎来电垂询，联系人：董先生。)