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ELISA定性测定定性测定的结果判断是对受检标本中是否含有待测抗原或antibody作出有或无的简单回答,分别用阳性、阴性表示。阳性表示该标本在该测定系统中有反应。阴性则为无反应。用定性判断法也可得到半定量结果,即用滴度来表示反应的强度,通用RNA提取,其实质仍是一个定性试验。在这种半定量测定中,将标本作一系列稀释后进行试验,呈阳性反应的***高稀释度即为滴度。根据滴度的高低,可以判断标本反应性的强弱,这比观察不稀释标本呈色的深浅判断为强阳性、弱阳性更具定量意义。在间接法和夹心法ELISA中,阳性孔呈色深于阴性孔。在竞争法ELISA中则相反,阴性孔呈色深于阳性孔。棉花等酚类、多糖类物质较多的植物DNA提取法:1取2g新鲜幼嫩的叶片放入研钵中,加入液氮后快速、充分研磨,待成极细的粉末状时迅速转入到50ml离心管中。2在50ml离心管中加入10ml冰预冷的提取缓冲液,在涡悬振荡器上充分混匀。3于4℃,2700×g离心20分钟,倒去上清液。4在沉淀中加入5ml裂解缓冲液,在涡旋振荡器上充分混匀。5于65℃水浴锅中温育30min。6加入5ml氯1仿/异戊1醇(24/1),并上下翻转以充分混合。7于4℃,2700×g离心5分钟。8转移上层水相至一新的50ml离心管中。9重复步骤7-9一次。10加入2/3体积的冰预冷的异丙1醇,并上下翻转以充分混合,至-20℃2h。11于4℃,1200×g离心10min。12在一新管中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液,用玻棒将DNA转入该管(如不能直接用玻棒缠出,可离心后倒出上清,再在其中加入20ml含80%乙醇15mmol/LNaAc溶液),放置20min后稍许离心,移走上清并吸出残存乙醇,室温干燥。13加入10mlTE(10mmol/LTris-HClPH=80,1mmol/LEDTA)并加入终浓度为20(g/L的RNaseA,过夜。14风干,用50μlTE缓冲液溶解,存于-20℃备用。信使RNA(mRNA)早先发现于1960年,在蛋白质合成过程中负责传递遗传信息、直接指导蛋白质合成,具有以下特点。1.含量低,占细胞总RNA的1%~5%。2.种类多,可达105种。不同***表达不同的mRNA。3.寿命短,不同mRNA指导合成不同的蛋白质,完成使命后即被降解。***mRNA的平均半衰期约为1.5分钟。脊椎动物mRNA的半衰期差异极大,平均约为3小时。4.长度差异大哺乳动物mRNA长度为5×102~1×105nt原核生物与真核生物的mRNA虽然在结构上有差异,但功能一样,都是指导蛋白质合成的模板。通用RNA提取-友名生物(推荐商家)由武汉友名生物技术有限公司提供。通用RNA提取-友名生物(推荐商家)是武汉友名生物技术有限公司今年新升级推出的,以上图片仅供参考,请您拨打本页面或图片上的联系电话,索取联系人:董先生。)
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