杂交技术***重要的因素之一是选择***适的杂交反应温度。若反应温度低于Tm10～15℃，碱基顺序高度同源的互补链可形成稳定的双链，原位杂交，错配对减少。若反应温度再低（Tm-30℃），虽然互补链之间也可形成稳定的双链，但互补碱基配对减少，错配对增多、氢键结合的更弱。如两个同源性在50%左右或更低些的DNA，调整杂交温度可使它们之间的杂交率变化10倍，因此在实验前必须首先确定杂交温度。通常有三种温度可供试验，即***适复性温度、苛刻复性温度及非苛刻复性温度。温度的选择及温度对杂交的影响见表18-3。***适复性温度（Optimunmrenaturationtemperature，TOR）：Tor=Tm–25℃苛刻复性温度：Ts=Tm–(10或15℃)非苛刻复性温度：Tns=Tm–(30或35℃)原位杂交(ISH)是用于***固定***和细胞中特定核酸靶标的强大技术，能够获得与***表达和遗传位点相关的时间和空间信息。虽然ISH的基本工作流程与印迹杂交近似，即核酸探针被合成、标记、纯化和特异性靶标退火，但其不同之处在于前者可通过可视化显示***内的结果来获得更多信息。如今有两种基本方法来实现可视化显示原位RNA和DNA靶标，即荧光(FISH)和显色(CISH)检测。每种检测方法本身的特点（见下表）使得FISH和CISH适用于截然不同的应用。虽然两种方法均使用标记的、与样本杂交的靶标特异性探针，但每种方法用于可视化显示样本的仪器不同。这里我们将强调每种方法的不同之处和各自的优势。武汉思特进科技发展有限公司成立于2007年，是一家以实验技术研发、实验产品研发、日化产品研发、实验项目承接为一体的高新技术公司；公司实验中心有分子生物学平台、细胞平台、光镜平台、植物组培平台、原核蛋白表达平台、日化产品生产平台；可以开展各类动、植物、***、细胞等生物实验。原位杂交是指将特定标记的已知顺序核酸为探针与细胞或***切片中核酸进行杂交，从而对特定核酸顺序进行精3确定量***的过程。原位杂交可以在细胞标本或***标本上进行。原位杂交技术(Insituhybridization，ISH)是分子生物学、***化学及细胞学相结合而产生的一门新兴技术，始于20世纪60年代。原位PCR；原位杂交细胞***和PCR的高灵敏度相结合的技术，在细胞（爬片、甩片或涂片）或***（石蜡、冰冻切片）上直接对靶***片段进行扩增，通过掺入标记基团直接显色或结合原位杂交进行检测的方法。原位杂交-思特进(推荐商家)由武汉思特进科技发展有限公司提供。武汉思特进科技发展有限公司位于湖北省武汉市江夏区高新四路40号葛洲坝。在市场经济的浪潮中拼博和发展，目前思特进在办公、文教项目合作中享有良好的声誉。思特进取得全网商盟认证，标志着我们的服务和管理水平达到了一个新的高度。思特进全体员工愿与各界有识之士共同发展，共创美好未来。)