***分型PCR可用于检测特定细胞或生物体中等位***的序列差异。例如，***敲除和敲入小鼠等生物的***分型[3]。引物对经设计位于目标区域侧翼，可根据是否存在扩增子及扩增子长度来检测遗传变异。但是如果为了检测特定核苷酸突变，则必须对扩增的序列进行进一步分析。例如，PCR扩增子测序就是研究单核苷酸变异（SNVs）和单核苷酸多态性（SNP）的方法之一。强烈推荐使用高保真DNA聚合酶，以防止在PCR过程中引入多余的突变。通过PCR进行***分型也是对***1症和遗传病中的突变进行遗传分析的一个基本方式。LAPCR的原理LAPCR的关键是具有3′→5′Exonuclease活性(Proofreading活性)的耐热性DNA聚合酶。在PCR过程中当有错误的碱基摄入时，反应性能将大幅度下降，TaKaRaExTaq和TaKaRaLATaq依靠3′→5′Exonuclease活性可将错配的碱基除去，从而延伸反应能顺利地进行下去，使长链DNA的扩增成为可能。突变：PCR克1隆的一大优点是能够通过克1隆将所需突变引入目的***中，以便进行突变研究。在定1点突变中，经过设计的PCR引物可将碱基置换、删除或插入整合到特定序列中。引物***到已克1隆至质粒中的序列上。随后，含有引入突变的PCR产物通过自我连接，重新生成环状质粒，并用于转化感受态细胞。测序：PCR是为测序富集模板DNA的一种相对简单的方法。为保证DNA序列准确性，Taqman探针法定量***，强烈建议使用高保真PCR来制备测序模板。在Sanger测序中，PCR扩增片段经纯化并用于测序反应。使用常用的测序引物结合位点对PCR引物的5′末端进行标记，以简化测序工作流程。二代测序（NGS）中，PCR被广泛用于构建DNA测序文库。在NGS文库制备中，DNA样品通过PCR反应富集（在起始量有限的情况下）并使用adaptor（以及用于多重检测的index）标记。除了具有高保真度，DNA聚合酶还应具有***小的扩增偏好性，从而使测序文库具有高覆盖度。Taqman探针法定量***-友名生物公司由武汉友名生物技术有限公司提供。行路致远，砥砺前行。武汉友名生物技术有限公司致力成为与您共赢、共生、共同前行的战略伙伴，更矢志成为其它具有竞争力的企业，与您一起飞跃，共同成功!)